1995 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
07557194
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Research Category |
Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
福井 裕行 大阪大学, 医学部, 助教授 (90112052)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
音田 治夫 武田薬品工業(株), 開拓第一研究所, 部長
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Keywords | ヒスタミン / ヒスタミンH_1受容体 / アフリカツメガエル卵母細胞 / 受容体サブタイプ / クローニング / 副腎髄質 |
Research Abstract |
ウシ副腎髄質由来のmRNAをショ糖密度勾配遠心により分画し、それぞれの分画をアフリカツメガエル卵母細胞に注入し、発現したH1受容体を電気生理学的に検出する方法で、3.5-kbおよび5.0-kbの2種類のヒスタミンH_1受容体mRNAが存在することを再現性よく観察した。3.5-kb H_1受容体mRNAの注入によりアフリカツメガエル卵母細胞に発現させたH_1受容体を刺激した場合、平均約50nAの内向きクロライド電流が引き起こされた。それに対して、5.0-kb H_1受容体mRNAの注入では内向き電流は平均約40nAであった。5.0-kbのH_1受容体mRNAを含む分画よりin vitroでの転写が可能なλZAPIIベクターを用いてcDNAライブラリーを作成し、expression cloningにより、即ち、in vitroの転写とアフリカツメガエル卵母細胞における受容体の発現系を組み合わせた方法で、作成したcDNAライブラリーのスクリーニングを行ない、H_1受容体サブタイプをコードするcDNAの単離を行っている。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Hiroi,T.: "Mepyramine,a histamine H_1receptor antagonist,inhibits the metabolic activity of rat and human P450 2D forms." J.Pharm.Exp.Ther.272. 939-944 (1995)
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[Publications] Fukui,H.: "Purification and characterization of[^3H]mepyramine,a histamine H_1antagonist,binding protein from rat liver:a highly homologous protein withcytochrome P450 2D." J.Biochem.117. 993-998 (1995)
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[Publications] Takagishi,T.: "Expression of the histamine H_1receptor gene in relation to athelosclerosis." Am.J.Pathol.146. 981-988 (1995)
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[Publications] 福井裕行: "ヒスタミンH_1受容体遺伝子の構造とプロモーター転写活性によるup-regulation機構" 日本臨床. 54. 389-395 (1996)
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[Publications] Fukui,H.: "Receptor desensitization and Ca^<2+>-signaling(ed.,Uchida,M.K.)" Japan Sci.Soc.Press,Tokyo,Japan, 13 (1996)
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[Publications] 福井裕行: "実験医学別冊 バイオマニュアルUPシリーズ 細胞内カルシウム研究プロトコール" 羊土社, 11 (1996)