1996 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
07670702
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
Principal Investigator |
小林 高義 東京医科歯科大学, 医学部, 講師 (70115343)
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Keywords | 筋緊張性ジストロフィー / ミオトニンプロテインキナーゼ / 筋小胞体 / 三塩基反復配列 / 体細胞分裂 / 骨格筋 / 心筋 / 神経支配 |
Research Abstract |
本年度の研究成果として, (1)筋緊張性ジストロフィー(DM)患者線維芽細胞の初代培養の経時的長期培養法によって,CTG repeatの延長が体細胞でおこり,更にDMの遺伝子産物であるmyotonin protein kinase(MtPK)の蛋白量が,CTG repeatの延長に比例して減少することを明らかにした. (2)MtPKのポリクローナル抗体を作製し,この抗体が,full lengthのMtPKを認識すること,成熟した骨格筋では,神経筋接合部のみではなく,筋小胞体(SR)のterminal cisternaeに局在することを免疫組織化学的,免疫電顕的に明らかにした. (3)ヒト骨格筋-ラット脊髄併置培養系を使用して,骨格筋の発達段階におけるMtPKmRNAの変化及びMtPKの局在の変化に関して,RT-PCR法,Western blot法及び免疫組織化学的方法で検討をおこない,神経支配後,一過性にMtPKmRNAが減少すること,MtPKは,神経支配によって,細胞内の局在を変え,SRに限局していくことを初めて明らかにした. (4)8例のDM骨格筋においては,MtPKの局在の異常の有無に関して検討を行い,DM筋のおいてもMtPKはSRに存在するが,筋内膜系は乱れており,MtPKの発現量は減少していていること,特に先天性DMでは,発現が著明に減少していることを明らかにした. (5)DMでは,心筋障害は重要な合併症であるが,正常ヒト心筋におけるMtPKの細胞内局在に関して,免疫組織化学的に検討をおこない,corbaral and junctional SRに存在していることを初めて明らかにした.
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Research Products
(4 results)
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[Publications] M.Shimokawa,S.Ishiura,N.kameda,M.Yamamoto,N.Sasagawa,N.Saitoh,H.Sorimachi,H.Ueda,S.Ohno,: "Novel isoform of myotonin protein kinase : Gene product of myotonic dystrophy is localized in the sarcoplasmic reticulum of skeletal muscle" American Journal of Pathology. (in press). (1997)
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[Publications] N.Kameda,T.Kobayashi,M.Shimokawa,S.Ishiura,H.Ueda,S.Ohno: "Developmental studies of myotonin protein kinase in cultured human muscle" Neurology. 46(supplement). A170- (1996)
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[Publications] T.Kobayashi,M.Shimokawa,N.Kameda,M.Yamamoto,S.Ishiura,H.Ueda,S.Ohno: "Myotonin protein kinase : gene product of myotonic dystrophy is localized in sarcoplasmic reticulum of skeletal muscle." Neurology. 46(supplement). A171- (1996)
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[Publications] M.Shimokawa,A.Igarashi,S.Ishiura,T.Kobayashi: "Further expansion of the myotonic dystrophy gent CTG repeat during somatic cell proliferation in vitro" Neurology. 46(supplement). A171- (1996)