1997 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
07670702
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Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
Principal Investigator |
小林 高義 東京医科歯科大学, 医学部, 講師 (70115343)
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Keywords | 筋電張性ジストロフィー / 筋緊張性ジストロフィープロテインキナーゼ / 筋小胞体 / 三塩基反復配列 / 骨格筋 / 心筋 / 免疫組織化学 / 免疫電顕 |
Research Abstract |
本研究の成果として(1)筋緊張性ジストロフィー(DM)患者線維芽細胞初代培養の経時的長期培養によってCTG repeatの延長が体細胞分裂によっておこり、更にDMの遺伝子産物であるDM protein kinase (DMPK)の蛋白量が,CTG repeatの延長に比例して減少ることを初めて明らかにした。(2)DMPKのポリクローナル抗体を作製し,この抗体が,full lengthのDMPKを認識すること、成熟した骨格筋では,従来の報告にある神経筋接合部、筋紡錘のみでなく、骨格筋のtype I筋線維に強く局在することを明らかにし、更に免疫組織化学的免疫電顕的に筋小胞体(SR)のterminal cisternaeに局在することを初めて明らかにした。また、心筋では、corbular及びjunctional SRに局在することを免疫組織化学的,免疫電顕的に初めて明らかにした。(3)DM骨格筋において、Western blotによる検討でDMPKの発現は低下し、形態学的にはDMPKはDM筋においてもSRの局在するが、DMPK陽性の筋小胞体は筋病変の初期から変化すること、更に古典的なDM筋病理上、DM筋の特徴的変化と考えられているcentral nuclei、nuclear chains、sarcoplasmic mass、type I atrophyはいずれもDMPK陽性筋線維に多く存在することを明らかにし、DM筋変性の基本はDMPKの機能異常によるものであることを初めて明らかにした。(4)更に、ヒト骨格筋-ラット脊髄併置培養系を使用して、ヒト骨格筋の発達段階におけるDMPK mRNAの変化及びDMPKの局在の変化に関して、RT-PCR法、Western blot法及び免疫組織化学的、電顕的検討を行い、神経支配後一過性にDMPKmRNAが減少すること、DMPKは神経支配によって細胞内の局在を変えSRに限局していくことを初めて明らかにした。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] M.Shimokawa, S.Ishiura,N.Kameda, M.Yamamoto,N.Ssasagawa, N.Saitoh, H.Sorimachi, H.Ueda, S.Ohno, K.Suzuki, T.Kobayashi: "Novel isoform of myotomin protein kindse : Gpne procluct of myotonic dystrophy is localiced in the sarcoplasmic reticulum of skeletal muccle" Am.J.Pathol.150(4). 1285-1295 (1997)
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[Publications] T.Kobayashi, M.Shimokawa, S.Ishiura, M.Yamamoto, N.Kameda, H.Tanak, H.Mizuawa, H.Ueda, S.Ohno.: "Myotonic dystrophy protein kinase is a sarcopldsm reticulum protein kindse specifically localized in type I muscle fibers without colocalizaticnof" SERCA II ATPase Basic and Applied Myology. 7(5). 311-316 (1997)
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[Publications] N.Kameda, H.Ueda, S.Ohno, M.Shimokawa, F.Usaki, S.Ishiura, T.Kobayashi: "Developmental regulation of myotonic dystrophy protein kindse in human muscle cells in vitro" Neuroscience. (in press) (1998)
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[Publications] H.Ueda, N.Kameda, T.Baba, N.Terada, M.Shimokawa, M.Yamamoto, S.Ishiura, T.Kobayashi, S.Ohno.: "Immunolocalization of myotomic dystrouph protein kindse in corblar and junctional sarcoplasmic reticulum of human edrdiac musde" Histochem.J.(in press). (1998)
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[Publications] 小林高義: "筋ジストロフィーはここまでわかった-Part2- 2)筋ジストロフィー臨床研究の現況 7.筋強直性ジストロフィー" 筋ジストロフィー研究連絡協議会(in press), (1998)