1995 Fiscal Year Annual Research Report
末梢神経組織の脱髄機序とその対策:ホスホリパーゼA_2酵素・遺伝子の発現・調節に関する細胞レベルでの解析
Project/Area Number |
07680879
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Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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Research Institution | Yokohama City University |
Principal Investigator |
小宮山 純 横浜市立大学, 医学部, 講師 (00170382)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
久保田 昭彦 横浜市立大学, 医学部, 助手 (40264668)
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Keywords | 末梢神経 / 脱髄 / ホスホリパーゼA_2 / マクロファージ / シュワン細胞 |
Research Abstract |
1)ラット坐骨神経挫滅後のPLA2の発現・経時的推移:成熟Long-Evansラットの坐骨神経を機械的に挫滅後1,3,5,7,14,21日目に取り出し、OCT compoundを用いて凍結固定した。クリオスタットで8um切片を作成し、(1)OX-42(ラットMac-1、マクロファージを認識)、(2)PLA2に対するポリクローナル・モノクローナル抗体を用いて、Vectastain ABC-Elite kitにより免疫染色を行なった。その結果、マクロファージと思われる細胞の一部がPLA2が陽性であった。2)培養シュワン細胞・マクロファージによるPLA2の産生・分泌:シュワン細胞は生後2日目のLong-EvansラットからでAra-C処理(Brocksらの方法)によって95%以上の純度で10%FBS加DMEMで培養された。マクロファージは非処理あるいは3%thioglycollateを腹腔内投与後に腹腔内から採取し、10%FBS加DMEMで培養された。培養シュワン細胞に対してこれまで他の細胞でPLA2酵素を誘導することが知られている、種々サイトカイン(IL 1,tumor necrosis factor(TNF)など)を投与して、PLA2の発現、産生・分泌を調べた結果、forskolin+TNF刺激で細胞内PLA2の発現が促進される傾向がみられた。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] Komiyama A: "Optic neuritis in cerebral Toxocariusis" J Neurol Neurosura Psychiatry. 59. 197-198 (1995)
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[Publications] Yamada H: "Schwann cell responses to torskolin and cyclic AMP analegues" Brain Res. 681. 97-104 (1995)
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[Publications] Yamada H: "Proliterative responses of Twitcher Schwann cells in vitro" J Neuro Pathol Exp Neurol. 54. 455 (1995)