1996 Fiscal Year Annual Research Report
MRSA耐性遺伝子mecAの制御遺伝子に関する研究
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07807113
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| Research Institution | HIROSHIMA UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
竹末 芳生 広島大学, 医学部・附属病院, 講師 (70197292)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
今村 祐司 広島大学, 医学部・附属病院, 助手 (70274082)
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| Keywords | 院内感染症 / 抗生剤耐性 / MRSA / 遺伝子 / 外毒素 / mecA / mecI / Southern hybridization |
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| Research Abstract |
平成8年度はmecI遺伝子のdirect sequencingを行った.Ultrafreeカラムにて精製したPCRで増幅させて得たmecIをテンプレートとした.mecI遺伝子のsequencingはdideoxynucleotide termination methodに基づきdsDNA Cycle Sequencing System kit (Gibco BRL, Gaithersburg, MD)を使用し行った.mecI geneを持っている株でmecI geneのmutationが起こっているかどうかを調べるためmecIを有しhighl resistantのcoagulase II型enterotoxin C, TSST-1産生型(IICT type)とcoagulase II型enterotoxin A, C, TSST-1産生型(IIACT type)とlow resistentのcoagulase IV型enterotoxin A産生型(IVA type)の1株づつ計3株のmecIのnucleotide sequencesを調べた。検索したIICT typeでは2241番目にTからAへのone nucleotide substitutionがありそれによりamino acid substitutionがIleからAsnへ変化していた。一方IIACT typeの株では2024番目にGからTへのone nucleotide substitutionがありそれによりamino acid substitutionがValからPheへ変化していた。しかし、low resistantのIVA typeではN315 strainと同様に、mecI geneのsequencesは全く損傷がなかった。N315はcoagulase II型であるがcoagulase IV型でこのようなintactな遺伝子をもった株が見つかったのは初めてである.前年度の検討でこれらmecIがintactな株では転写が少なく,mecIが機能していない株では転写が強く認められたが,mecI geneの欠失やpoint mutationのある株は中等度から高度耐性と耐性度に幅があり,耐性度の差をmecIの遺伝子変化のみで説明することは不可能であった.
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