2008 Fiscal Year Annual Research Report
肝炎・肝硬変・肝癌における免疫担当細胞のmicroRNAomeによる病態生理解明
Project/Area Number |
07J00879
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Research Institution | Nippon Medical School |
Principal Investigator |
水口 義昭 Nippon Medical School, 医学部, 特別研究員(PD)
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Keywords | microRNA / 肝癌 / 上皮間葉移行 |
Research Abstract |
今年度は癌細胞の転移の促進や悪性度と関連しているmiRNAの機能試験を開始した。 最近癌の転移や悪性度と関連があるとされる上皮間葉転換(EMT)という現象にmiRNA200familyが強く関与するとする報告がある。 まず、EMTを惹起する物質としてSH3ドメインをもった小分子(sprr2A)がこれまでの研究で判明しているため、それを用いた。用いた細胞株は胆管癌細胞3種を選んだ。このたんぱく質を発現するベクターを遺伝子導入し安定に発現する株を樹立した。 SH3安定発現株では有意にmiRNA200familyの発現が抑制され、その抑制はDNA levelですでに抑制されていることが判った。これらの結果はRealtime PCRにて確認した。 miRNAの前駆体(Primary miRNA,Premature miRNA)の発現とmiRNAの発現が完全にパラレルでないことよりmiRNAの成熟過程で何らかのPost transcriptionalな制御機構が存在することが示唆された。 蛋白質レベルの検討では多くのキナーゼ蛋白がEMT株で過剰なリン酸化を起こしており、また染色による検討でも細胞内でのDistributionに変化をきたしている。 これらのキナーゼ蛋白をノックダウンすると、有意に細胞の増殖などの生理機能に変化がみられる。 SH3ドメインのbinding arrayや先のEMT発現株のDNA arrayの結果よりすべての細胞株でWnt signalやIntegrin signalの変化が認められ、また、いくつかのキナーゼ蛋白の活性が有意に変動している。つまり、SH3ドメインがmiRNAの発現変化を惹起する機構が存在するとすれば、これらのキナーゼ蛋白の活性の変化によるシグナルの異常がmiRNAのTranscriptionへ関与していることが予想される。
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Research Products
(3 results)
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[Journal Article] MicroRNA (miRNA) cloning analysis reveals sex differences in miRNA expression profiles between adult mouse testis and ovary2008
Author(s)
Mishima T, Takizawa T, Luo SS, Ishibashi O, Kawahigashi Y, Mizuguchi Y, Ishikawa T, Mori M, Kanda T, Goto T, Takizawa T.
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Journal Title
Reproduction 136
Pages: 811-822
Peer Reviewed
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[Journal Article] Quantitative analysis of fluorouracil-related genes in chronic viral hepatitis using microdissection2008
Author(s)
Kakinuma D, Yoshida H, Mamada Y, Taniai N, Mizuguchi Y, Takahashi T, Shimizu T, Ishikawa Y, Akimaru K, Naito Z, Tajiri T.
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Journal Title
Hepatogastroenterology 55
Pages: 826-830
Peer Reviewed