1998 Fiscal Year Annual Research Report
子宮癌・卵巣癌発生機序に関するテロメラーゼ活性の分子生物学的研究
Project/Area Number |
08671898
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Research Institution | HIROSHIMA UNIVERSITY |
Principal Investigator |
永井 宣隆 広島大学, 医学部, 助教授 (90198292)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
村上 順子 広島大学, 医学部, 助手 (80294560)
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Keywords | 子宮癌 / hTERC卵巣癌 / テロメラーゼ / hTERT / hTERCアンチセンス |
Research Abstract |
1. テロメラーゼの中でcatalytic subunitのhuman telomerase reverse transcriptasc(以下hTERT)発現とテロメラーゼ活性、癌化との関連性を検索する目的で、子宮体癌例32検体と正常子宮内膜例8検体を対象とした。hTERT発現はRT-PCR法で確認し、コントロールとしたβ-tubulinのband intensityに対するhTERTの比をdensitometerにて半定量化した。また、テロメラーゼ活性も昨年報告した方法で定量化し、relative telomerase activity(以下RTA)として数値化した。その結果、hTERT発現とRTAとの間には有意な相関が得られ(r=0.48,p<0.05,n=40)、体癌組織におけるhTERT発現、RTAはそれぞれ0.48,44.05と正常子宮内膜の0.02,1.98に比べ有意に高値を示した。そこでhTERTがテロメラーゼ活性を制御している可能性が確認され、またhTERTの検出は、癌の診断に有益であることが示唆された。 2. テロメラーゼ活性による細胞の増殖機序を抑制する目的で、テロメラーゼの鋳型RNA部であるhTERC(the RNA component of human telomerase)アンチセンスを用いて細胞増殖抑制効果を判定した。対象は子宮内膜癌株HEC-1,卵巣癌株MCAS,RMUG-L,RMVG-S,RSTGに対し、FITC標識したhTERCアンチセンスをlipofectin法にて導入した。FITC陽性細胞はflow cytometer sortingにて回収し、テロメラーゼ活性はTRAPアッセイ後、簡易定量した。その結果、FITC陽性細胞は各細胞株の55〜95%に検出され、hTERCアンチセンスを導入したことで、テロメラーゼ活性はいずれの株も80%以上の抑制が認められた。一方、lipofection単独でも約20%の細胞増殖抑制効果が認められ、lipofectinによる細胞毒性の影響と考えられた。以上より、hTERCアンチセンスはテロメラーゼ活性と細胞増殖能を抑制し、癌の抗腫瘍効果を有し、臨床応用への可能性が示唆された。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Nagai N.: "Semiquantitative analysis of telomerase activity in cervical cancer and precancerous lesions." 6. 325-328 (1999)
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[Publications] Nagai N.: "Diagnostic value of telomerase activity in gynecological malignancy." Int.J.Gynecol.Cancer. 8. 481-488 (1998)
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[Publications] 永井宣隆: "婦人科細胞診検体におけるテロメラーゼ活性の検出" 日臨細胞広島県支部会報. 19. 19-22 (1998)
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[Publications] Murakami J.: "Telomerase activity in body cavity fluid and peritoneal washings in uterine and ovarian cancer." J.Int.Med.Res.26. 129-139 (1998)
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[Publications] 村上 順子: "卵巣腫瘍における腫瘍マーカーとしてのテロメラーゼ活性,テロメア長" 日本臨状. 56. 218-223 (1998)