増殖細胞におけるCdk2の細胞内輸送とp27によるCdk2活性の制御機構の解明

2008 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08F08132
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 池田 正明 Tokyo Medical and Dental University, 大学院・医歯学総合研究科, 准教授
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): PHILIPPE Olivier D.L. 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 外国人特別研究員
• Keywords: 国際研究者交流 / フランス / サイクリン依存性キナーゼ / 細胞周期 / クロマチン / 細胞核 / CDK阻害タンパク質 / タンパク質

Research Abstract

サイクリン依存性キナーゼ(Cdk)の一つであるCdk2は、細胞周期のG1後期からS期に活性化され、DNA複製に中心的な働きをしている。一方、Cdk2活性の抑制には、CDK阻害タンパク質であるp27が関与している。本研究は、核内においてクロマチンに結合したCdk2におけるリン酸化修飾およびCdk2制御因子との相互作用を明らかにし、Cdk2の制御機構における新たな知見を得ることを目指している。
新しい核細胞質分画法の確立
既に開発した核細胞質分画法、および報告されているどの核細胞質分画法を用いても、p27等の低分、子量タンパク質の核外への漏出を防ぐことが出来ないことが判明した。p27は重要なCdk2制御因子の一つであることから、本研究遂行のためには、p27を含む核内低分子量タンパク質の漏出が少ない核細胞質分画条件を確立する必要があることが明らかとなった。
クロマチン上でのCdk2活性制御機構の解析
Cdk2はサイクリンを含む多くのタンパク質と複合体を形成し、G1-S期にクロマチンに結合することが示されている。本年度の解析で、クロマチン非結合Cdk2は、TritonX-100等の界面活性剤で容易に抽出されるのに対して、クロマチン結合Cdk2は抽出されないことを見出した。さらに、クロマチン結合Cdk2が、その活性を保ったまま高塩濃度処理により抽出されることを明らかにした。さらにCdk2の活性化には、当初計画した細胞質から核内へのCdk2の輸送よりも、核内におけるCdk2の制御がより重要であることを見出した。

Research Products

• [Journal Article] Activation of the cyclin D2 and cdk6 genes through NF-kB is critical for cell cycle progression induced by HTLV-I Tax (2008)
  • Author(s): Iwanaga R, Ozono E, Fujisawa J, Ikeda MA, Okamura N, Huang Y, Ohtani K
  • Journal Title: Oncogene 27 Pages: 5635-5642
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] E2F-like elements in p27(Kip1) promoter specifically sense deregulated E2F activity (2008)
  • Author(s): Ozono E, Komori H, Iwanaga R, Ikeda, MA, Iseki S, Ohtani K
  • Journal Title: Genes Cells 14 Pages: 89-99
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Tumor Growth Suppression by the Coactivator p300 (2008)
  • Author(s): Suganuma T, Ikeda MA
  • Journal Title: J. Oral Biosci. 50 Pages: 115-124
• [Journal Article] Defect in Ser46 Phosphorylation of p53 Protein : A Resistance Mechanism against p53 Gene Transfer in Oral Squamous Cell Carcinoma Cells (2008)
  • Author(s): Ichwan, SJA, Ikeda MA
  • Journal Title: J. Oral Biosci. 50 Pages: 98-106
• [Journal Article] Inhibitory effect of CT domain of CCN3/NOV on proliferation and differentiation of osteogenic mesenchymal stem cells, Kusa-A1 (2008)
  • Author(s): Katsuki Y, Sakamoto K, Minamizato T, Makino H, Umezawa A, Ikeda MA, Perbal B, Amagasa T, Yamaguchi A, Katsube K
  • Journal Title: Biochem. Biophys. Res. Commun. 568 Pages: 808-814
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Spatiotemporal dynamics of Cdk2 regulation in the cell cycle (2008)
  • Author(s): Olivier DL Philippe, Shameen K Saadat, Ikeda MA
  • Organizer: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会(BMB2008)
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 20081209-20081212
• [Presentation] DRIL1によるp53のフィードバック制御 (2008)
  • Author(s): 乙津めぐみ, Solachuddin J. A. Ichwan, Widya Lestari, 山田俊平, 池田正明
  • Organizer: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会(BMB2008)
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 20081209-20081212
• [Presentation] 転写因子E2Fによる癌性変化と増殖刺激の識別 (2008)
  • Author(s): 大園瑛子, 池田正明, 井関祥子, 大谷清
  • Organizer: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会(BMB2008)
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 20081209-20081212
• [Presentation] Role of caspase-8 mutation in chemosensitivity of HOC313 oral squamous cell carcinoma cell line (2008)
  • Author(s): Liu J, Tsuchida N, Ikeda MA
  • Organizer: 第67回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋
  • Year and Date: 20081028-20081030
• [Presentation] Role of DRIL1 in p53-target gene expression and p53-mediated apoptosis (2008)
  • Author(s): Ichwan SJA, Otsu M, Lestari W, Yamada S, Ikeda MA
  • Organizer: 第67回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋
  • Year and Date: 20081028-20081030
• [Presentation] The Cdk inhibitor p27/KIP1 gene senses pRB dysfunction through E2F (2008)
  • Author(s): Ozono E, Ikeda MA, Ohtani K
  • Organizer: 第67回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋
  • Year and Date: 20081028-20081030
• [Presentation] Expression of estrogen receptors during postnatal development of the brain (2008)
  • Author(s): Ikeda Y, Ikeda MA
  • Organizer: EHRLICH II, 2nd World Conference on Magic Bullets
  • Place of Presentation: Nurnberg, Germany
  • Year and Date: 20081003-20081005
• [Presentation] Chemoresistance of a head and neck squamous cell carcinoma cell line carrying caspase 8 mutation (2008)
  • Author(s): Juan Liu, Nobuo Tsuchida, Hirosi Uematsu, Masa-Aki Ikeda
  • Organizer: 日中歯科医学大会2008
  • Place of Presentation: 西安、中国
  • Year and Date: 20080928-20080929
• [Book] Distinct transcriptional regulation by E2F in cell growth and tumor suppression (2008)
  • Author(s): Ohtani K, Komoril H, Ozono K, Ikeda MA, Iwanaga R.
  • Publisher: Transworld Research Network(印刷中)