2009 Fiscal Year Annual Research Report
動脈性化学受容細胞における二酸化炭素受容機構の解明
Project/Area Number |
08J02673
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Research Institution | Gifu University |
Principal Investigator |
若井 淳 Gifu University, 連合獣医学研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | 頚動脈小体 / 高二酸化炭素 / 低酸素 / チロシン水酸化酵素 / 血管内皮成長因子 / 化学受容 / 低酸素適応 / 分子生物学 |
Research Abstract |
頚動脈小体におけるチロシン水酸化酵素(TH)および血管内皮成長因子(VEGF)のmRNAの発現変化をより詳細に調べるため2、4、6、8、12、24時間の低酸素暴露、高二酸化炭素暴露および低酸素と高二酸化炭素の同時暴露を行い、リアルタイムRT-PCRを用いた解析を行った。その結果、低酸素暴露において、TH mRNAは8時間をピークとする発現増加(約7.8倍)を、VEGF mRNAは4時間をピークとする発現増加(約5.5倍)を示した。低酸素と高二酸化炭素の同時暴露ではTH mRNAは12時間をピークとする発現増加(約5.8倍)を、VEGF mRNAは8時間をピークとする発現増加(約3.4倍)を示した。高二酸化炭素暴露によるTH mRNAおよびVEGF mRNAの発現変化は観察されなかった。また、THに関してはmRNAのみならずタンパクの発現変化を観察するために間接蛍光抗体法を行い、蛍光強度を測定することで発現量の半定量を行った。その結果、低酸素暴露では12時間から約1.4倍の発現増加が観察され、24時間でも約1.5倍の発現増加を示した。低酸素と高二酸化炭素の同時暴露では12時間では発現増加を示さなかったが、24時間では約1.5倍の発現増加を示した。高二酸化炭素暴露によるTHタンパクの発現変化は観察されなかった。以上より、高二酸化炭素は単独ではTH mRNAおよびVEGF mRNAの発現量に影響を与えないが、低酸素による発現増加を抑制する働きを持つことが示唆された。 さらに、頚動脈小体において3種の暴露条件によって影響を受ける分子群の網羅的な解析を行うためマイクロアレイ実験を行った。現在、得られたデータから化学受容に関与すると考えられる分子を検索中である。化学受容に関与すると思われる分子については、リアルタイムRT-PCRを用いたより詳細な発現変化の解析を行う予定である。
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Research Products
(6 results)