Bリンパ球の細胞死および増殖の制御におけるCDKインヒビターの機能の解析

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09044292
• Research Institution: Medical Research Intitute, Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 鍔田 武志 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (80197756)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): RETH Michael マックス, プランク研究所, 教授 ; RAJEWSKY Kla ケルン大学, 遺伝研, 教授 ; HOWARD Maure DNAX研究所, 部長 ; 饗場 祐一 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助手 (00273516) ; 安達 貴弘 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 講師 (50222625)
• Keywords: Bリンパ球 / CDKインヒビター / CDK / 細胞周期 / 細胞死 / c-Myc / 抗原受容体 / 誘導的発現

Research Abstract

B細胞株WEHI-231では、抗原受容体(BCR)架橋による細胞死の際にCDKインヒビターの発現上昇がおこる。CDKインヒビターが細胞死誘導に関与するかを明かにする目的で、誘導的発現系を用いてWEHI-231にCDKインヒビターの発現を誘導したところ、WEHI-231は細胞死をおこした。この結果は、CDKインヒビターがBCR架橋によるB細胞の細胞死に関与することを示唆する。線維芽細胞などの細胞周期停止を伴う細胞死にはc-Mycの関与が示唆されるが、c-Myc発現プラスミドを導入したWEHI-231ではBCR架橋による細胞死に耐性になることが報告され、B細胞ではc-MycがBCR架橋による細胞死に阻害的に働くと考えられてきた。しかし、我々は、誘導的にc-Mycを発現する系を樹立し、c-Myc発現のみでWEHI-231が細胞死をおこすことから、以前の結果は、アポトーシス耐性株を選択したためのアーチファクトであることを明かにし、さらに、c-MycがBCR架橋による細胞死を増強することを示した。この結果もまた、CDKインヒビターによる細胞周期停止がB細胞の細胞死に関与することを支持する。さらに、BCR架橋によるB細胞の細胞死は抗CD40抗体や抗CD72抗体処理で阻害されるが、細胞死が阻害される場合にはCDKインヒビターの発現は低下する。我々は、CD72がチロシンキナーゼLynによりリン酸化され、フォスファターゼSHP-1と会合して、BCRを会するシグナル伝達を負に制御することを明かにした。また、遺伝子欠損ニワトリB細胞株を用いて、BCR刺激による細胞死誘導の際にc-mycの転写誘導がおこり、これがLynにより抑制されることを明かにした。以上の結果から、LynがCD72などを介してc-Myc,CDKインヒビターを負に制御し、細胞死の阻害がおこると示唆された。

Research Products

• [Publications] Adachi,T.: "The B cell surface protein CD72 recruits the tyrosine phosphatase SHP-1 upon tyrosine phosphorylation." J.Immunol.160・10. 4662-4665 (1998)
• [Publications] Watanabe N.: "Antigen receptor cross-linking by anti-immunoglobulin antibodies coupled to cell surface membrance induces rapid apoptosis of normal spleen B cells." Scand.J.Immunol.47・6. 541-547 (1998)
• [Publications] Hagiyama,H.: "Signaling through the antigen receptor of B lymphocytes activates a pathway independent of p53-mediated transactivation for c-Myc-induced apoptosis." Oncogene.(in press).