2000 Fiscal Year Annual Research Report

エネルギー代謝系のがん細胞特異性を利用した抗がん剤のデザインとその応用

Research Project

Project/Area Number	09357020
Research Institution	University of Tokushima
Principal Investigator	寺田弘徳島大学, 薬学部, 教授 (00035544)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	堀均徳島大学, 工学部, 教授 (90119008) 山崎尚志徳島大学, 薬学部, 助手 (20271083) 篠原康雄徳島大学, 薬学部, 助教授 (60226157)
Keywords	II型ヘキソキナーゼ / エネルギー代謝 / 酸化的リン酸化 / 解糖系 / 抗がん剤 / ポーリン / 1型グルコース輸送担体 / ミトコンドリア
Research Abstract	本研究では、抗がん開発のためのターゲットの探索研究に重点をおいた実験を展開してきた。これまでの研究で、1型の糖輸送担体とII型ヘキソキナーゼの発現が、細胞の増殖条件の変動に伴って、協調的かつ選択的に亢進することを明らかにすることができ、その制御因子として、血清が考えられることを明らかにしたので、今年度は、その機構の解明に焦点をあてた研究を行った。血清刺激は、もっぱら繊維芽細胞で検討されているため、3Y1細胞を用いた解析を行った。常法に従って、3Y1を低血清培地に順化させ、その後、培地を15%の血清を含むものに変え、1型の糖輸送担体とII型ヘキソキナーゼの転写レベルの経時的な変動を観察した。その結果、血清刺激開始2〜4時間後に、1型の糖輸送担体とII型ヘキソキナーゼの転写レベルが、特異的かつ顕著に亢進することを見いだした。しかし、これらの知見は、ヘキソキナーゼは血清刺激に応答して変動しない、という過去の報告に矛盾したものである。そこで、この矛盾について更に検討すベく、抗体を用いた解析を行った。これまでII型ヘキソキナーゼに対する抗体に関する報告が全くなされていなかったため、まずその調製を行い、得られた抗体がII型ヘキソキナーゼを特異的に認識することを確認した。次いで、血清刺激した細胞におけるII型ヘキソキナーゼタンパク質の発現を解析したところ、II型ヘキソキナーゼのメッセージレベルは血清刺激に応答して上昇するが、タンパク質レベルは変動しないことを明らかにすることができ、これまでの報告を矛盾無く説明することができた。

Research Products

(9 results)

All Other

All Publications (9 results)

[Publications] T.Daikoku et al.: "Specific elevation of transcript levels of particular protein subtypes induced in brown adipose tissue by cold exposure"Biochim.Biophys.Acta. 1457. 263-272 (2000)
[Publications] N.Yamazaki et al.: "Novel Expression of Equivocal Messages Containing Both Regions of Choline/Ethanolamine Kinase and Muscle Type Carnitine Palmitoyltransferase I"The Journal of Biological Chemistry. 275-41. 31739-31746 (2000)
[Publications] Y.Shinohara et al.: "Characterization of porin isoforms expressed in tumor cells"Eur.J.Biochem.. 267. 6067-6073 (2000)
[Publications] C.Aoyama et al.: "Structure and characterization of the genes for murine choline/ethanolamine kinase isozymes α and β^1"Journal of Lipid Research. 141-3. 452-464 (2000)
[Publications] M.Hashimoto et al.: "Irreversible Extrusion of First Loop Facing the matrix of the Bovine Heart Mitochondrial ADP/ATP Carrier by Labeling the Cys^<56> Residue with the SH-Reagent Methanethiosulfonate^1."J.Biochem.. 127. 443-449 (2000)
[Publications] Y.Shinohara and H.Terada: "Uncouplers of Oxidative Phosphorylation : Activities and Physioiogical Significance"Marcel Dekker.New York. 1. 107-126 (2000)
[Publications] Y.Shinohara et al: "Roles of hexokinase in aberrant sugar metabolism of tumor cells"Recent Res.Devel.Bioenerg. 1. 1-8 (2000)
[Publications] Y.Shinohara et al.: "Growth condition dependent synchronized changes in the transcript levels of type II hexokinase and type 1 glucose transporter in tumor cells."Biochim.Biophys.Acta. 1499. 242-248 (2001)
[Publications] E.Majima et al.: "Specific labeling of the bovine heart mitochondrial phosphate carrier with fluorescein-5-isothiocyanate : roles of Lys 185 and putative adenine nucleotide recognition site in phosphate transport"J.Biol.Chem.. (in press).

2000 Fiscal Year Annual Research Report

エネルギー代謝系のがん細胞特異性を利用した抗がん剤のデザインとその応用

Principal Investigator

寺田 弘 徳島大学, 薬学部, 教授 (00035544)

Research Products

[Publications] T.Daikoku et al.: "Specific elevation of transcript levels of particular protein subtypes induced in brown adipose tissue by cold exposure"Biochim.Biophys.Acta. 1457. 263-272 (2000)

[Publications] N.Yamazaki et al.: "Novel Expression of Equivocal Messages Containing Both Regions of Choline/Ethanolamine Kinase and Muscle Type Carnitine Palmitoyltransferase I"The Journal of Biological Chemistry. 275-41. 31739-31746 (2000)

[Publications] Y.Shinohara et al.: "Characterization of porin isoforms expressed in tumor cells"Eur.J.Biochem.. 267. 6067-6073 (2000)

[Publications] C.Aoyama et al.: "Structure and characterization of the genes for murine choline/ethanolamine kinase isozymes α and β^1"Journal of Lipid Research. 141-3. 452-464 (2000)

[Publications] M.Hashimoto et al.: "Irreversible Extrusion of First Loop Facing the matrix of the Bovine Heart Mitochondrial ADP/ATP Carrier by Labeling the Cys^<56> Residue with the SH-Reagent Methanethiosulfonate^1."J.Biochem.. 127. 443-449 (2000)

[Publications] Y.Shinohara and H.Terada: "Uncouplers of Oxidative Phosphorylation : Activities and Physioiogical Significance"Marcel Dekker.New York. 1. 107-126 (2000)

[Publications] Y.Shinohara et al: "Roles of hexokinase in aberrant sugar metabolism of tumor cells"Recent Res.Devel.Bioenerg. 1. 1-8 (2000)

[Publications] Y.Shinohara et al.: "Growth condition dependent synchronized changes in the transcript levels of type II hexokinase and type 1 glucose transporter in tumor cells."Biochim.Biophys.Acta. 1499. 242-248 (2001)

[Publications] E.Majima et al.: "Specific labeling of the bovine heart mitochondrial phosphate carrier with fluorescein-5-isothiocyanate : roles of Lys 185 and putative adenine nucleotide recognition site in phosphate transport"J.Biol.Chem.. (in press).

寺田弘徳島大学, 薬学部, 教授 (00035544)