1997 Fiscal Year Annual Research Report
冠攣縮の発症機序にかかわる一酸化窒素合成酵素(eNOS)遺伝子変異の機能解析-
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09670732
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
吉村 道博 熊本大学, 医学部附属病院, 助手 (30264295)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
泰江 弘文 熊本大学, 医学部, 教授 (40174502)
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| Keywords | 一酸化窒素 / 一酸化地租合成酵素 / 遺伝子変異 / 遺伝子解析 / 狭心症 / 冠攣縮 / 心筋梗塞 / 冠動脈 |
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| Research Abstract |
冠攣縮は日本人に多い疾患であり、多くの虚血生心疾患の病態に関与している。我々はこの冠攣縮の病態に一酸化窒素(NO)が深くかかわっていることを示してきた。さらに、その遺伝的な背景を探る目的で、血管内皮型一酸化窒素合成酵素(eNOS)遺伝子変異の検索を始めた。eNOS遺伝子26個の全てのエクソンならびに5′隣接領域の遺伝子をPCR-SSCPで検索した結果、エクソン7にGlu298Asp変異を、また5′隣接領域にT^<-786>→C、A^<-922>→GおよびT^<-1468>→Gを見出した。またT^<-786>→C、A^<-922>→GおよびT^<-1468>→Gはそれぞれがリンクして存在することも判明した。我々はこの遺伝子変異がそれぞれ冠攣縮に有意にかかわっていることをvolunteerを含めた多数例の症例を用いて確認している。これらの変異が単なる遺伝的マーカーであるのそれともその変異自体がeNOSに機能異常を与えているのかをin vitroおよびin vivoの実験系で検討した。現在、特に5′隣接領域についてその機能的変化が明らかとなっている。in vitroの機能軌跡をルシフェラーゼアッセイを用いて行ったが、その結果、3つの点変異の内、T^<-786>→Cが有意にルシフェラーゼ活性を低下させ、他のA^<-922>→GおよびT^<-1468>→Gは影響を及ぼさないことが判明した。さらに、in vivoの検討では遺伝子変異を持つ症例と野生型の症例では、その血中のNOの代謝産物であるnitrite/nitrateに差があることが明らかとなった。以上のことから少なくともT^<-786>→C変異は、直接eNOSの転写に影響を与え、NOの合成を低下させて冠攣縮を引き起こし易い状況にしていると思われた。
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[Publications] Miyamot Y. et. al: "Endothelial nitric oxide synthase is positively associated with essential hypertension." Hypertension. (in press). (1988)
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[Publications] Shimasaki Y. et al: "Association of the Missense Glu298Asp Mutation of the Endothelial Nitric Oxide Synthase Gene With Myocardial Infarction." J. Am Coll Cardiol. (in press). (1998)
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[Publications] Motoyama T. et al: "Endothelium-dependent vasodilation in the brachial artery is impaired in smokers : effect of vitamin C." Am J Physiol. H1644-H1650 (1998)
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[Publications] Kugiyama K. et al: "Nitric oxide-mediated flow-dependent dilation is impaired in coronary arteries in patients with coronary spastic angina." J Am Coll Cardiol. 30(4). 920-926 (1997)
