1997 Fiscal Year Annual Research Report

黄体化ホルモン受容体を中心としたG蛋白共役型受容体膜貫通領域の3次元構造の決定

Research Project

Project/Area Number	09671051
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	小杉眞司京都大学, 医学研究科, 助手 (50252432)
Keywords	黄体化ホルモン受容体 / G蛋白共役型受容体 / 家族性男子思春期早発症 / constitutive activation / interhelical bond / モデリング / double mutant / 水素結合
Research Abstract	家族性男子思春期早発症(FMPP)において黄体化ホルモン受容体(LHR)の活性化型変異Asp^<578>→Glyを初めて同定した。ホルモン刺激なしに活性化を起こすconstitutive activation(CA)を示すものである。Asp^<578>を他のアミノ酸に置換した。Asnへの変異ではCA(-)Gluへの変異でCA(+)を示し、Asp^<578>のβ-C=O基で形成される水素結合がLHRの非活性化状態維持に寄与していることを証明した。水素結合のpartnerを同定するため、モデリングにより、possible partnerとして第7膜貫通helixのAsn^<619>を見いだした。Asn^<619>をGlu、Glnに変異させるとCAを示した。D578SはCAを示すが、double mutation(D578S+N619Q)では、CAは消失、野生株と同じ性状を示した。このbouble mutationでは、アミノ酸578と619の側鎖の長さの和が野生株のAsp^<578>とAsn^<619>のそれとほぼ同じであり、SerとGlnはAspとAsnと同様に水素結合を起こしうることから、Asp^<578>とAsn^<619>の空間配置はコンピュータモデルより想定されたものと一致すると考えられ、水素結合の存在が裏付けられた。受容体非活性化状態を維持する膜貫通領域のinterhelical bond networkの一端を初めて明らかとした。やはりFMPPで同定されたAsp^<564>変異について検討した。Asp^<564>→GluではCA(-)、Asnへの変異でCA(+)を示し、Asp^<564>のnegative chargeが非活性化状態維持に重要であった。Asp^<578>の変異とのdouble mutantsではCAの程度は各々の変異のそれと相加的であり、Asp^<578>とは異なるinterhelical bond networkの存在を明らかにした。

Research Products
(20 results)

All Other

All Publications (20 results)

[Publications] Yoshida A, Sasaki N, Taniguchi S, Mitani Y, Ueta Y, Hattori K, Sato R, Hisatome I, Mori T, Shigemasa C, Kosugi S.: "Different electrophysiological character of I^-,CIO_4^- and SCN^- in the transport by Na^+/I^- symporter." Biochem Biophys Res Commun. 231. 731-734 (1997)
[Publications] Kosugi S, Matsuda A, Hai N, Aoki N, Sugawa H, Mori T: "Aspartate-474 in the first cytoplasmic loop of the thyrotropin receptor is crucial for receptor activation." FEBS Less. 406. 139-141 (1997)
[Publications] Mori T, Sugawa H, Kosugi S, Ueda M, Hai N, Matsuda A: "Recent trend in the management of Graves' hyperthyoidism in japan : oponion survey results, especially on the combination of therapy of antithyroid drug and thyroid hormone." Endocr J. 44. 509-517 (1997)
[Publications] Mori T, Sugawa H, Kosugi S, Ueda M, Inoue D, Akamizu T.: "Effectiveness of a short-term steroid treatment on the reduction in goiter size in antithyroid drug-treated patients with Graves' disease." Endocr J. 44. 575-580 (1997)
[Publications] Matsuda A, Kosugi S: "A homozygous missense mutation of the sodium/iodide symporter gene causing iodide transport defect." J Clin Endocrinol Metab. 82. 3966-3971 (1997)
[Publications] Muller J, Gondos B, Kosugi S, Mori T, Sheker A: "Severe testotoxicosis phenotype associated with a strongly activating mutation of the lutropin receptor." J Med Genet. (in press). (1998)
[Publications] Kosugi S, Mori T, Shenker A: "An anionic residue at position 564 is important for maintaining the inactive conformation of the human lutropin/choriogonadotropin receptor." Mol Pharmacol. (in press). (1998)
[Publications] Sugawa H, Ueda M, Matsuda A, Hai A, Yoshida A, Kosugi S: "Lack of measurable maximal capacity of inorganic iodide in non-thyroid cell." Thyroidology. (in press). (1998)
[Publications] Kosugi S, Sugawa H, Mori T: "Epitope analvsis of the thyrotropin receptor,1997." Mol Cell Endocrinol. 128. 11-18 (1997)
[Publications] 小杉眞司: "TSH受容体の構造と機能・抗原部位。" Mebio. 14. 84-91 (1997)
[Publications] 小杉眞司、松田彰、須川秀夫、森徹: "甲状腺機能に対する喫煙産物の影響-ナトリウム・ヨードシンポーターに対する影響-" 平成8年度喫煙科学研究財団研究年報. 574-578 (1998)
[Publications] 小杉眞司: "TSH受容体異常症。" 医学のあゆみ別冊(Basedow病と橋本病). 17-24 (1997)
[Publications] 小杉眞司: "高度先進医療における遺伝子診断。" 遺伝子医学. 1. 80-84 (1997)
[Publications] 小杉眞司、森徹: "TSH受容体。" 生体の科学. 48. 460-642 (1997)
[Publications] 小杉眞司、井上大輔、須川秀夫: "糖蛋白ホルモン受容体異常の遺伝子診断。" 公益信託臨床病理学研究振興基金研究報告書. 10. 21 (1997)
[Publications] 小杉眞司: "ヨード濃縮障害におけるヨードトランスポータ遺伝子変異。" Molecular Medicine. 35. 96-102 (1998)
[Publications] 小杉眞司: "甲状腺のヨード摂取機構。" 遺伝子医学. 2. 63-67 (1998)
[Publications] 小杉眞司: "TSH受容体遺伝子変異による疾患。" 日本臨床。別冊(受容体研究の進歩と臨床). (印刷中). (1998)
[Publications] 小杉眞司、森徹: "家族性思春期早発症。" Annunal Review内分泌・代謝1997. 54-61 (1997)
[Publications] 小杉眞司、森徹: "受容体機能とその評価法:TSH受容体" 日本臨床特別号(現代臨床機能検査). 480-482 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

黄体化ホルモン受容体を中心としたG蛋白共役型受容体膜貫通領域の3次元構造の決定

Principal Investigator

小杉 眞司 京都大学, 医学研究科, 助手 (50252432)

Research Products

[Publications] Yoshida A, Sasaki N, Taniguchi S, Mitani Y, Ueta Y, Hattori K, Sato R, Hisatome I, Mori T, Shigemasa C, Kosugi S.: "Different electrophysiological character of I^-,CIO_4^- and SCN^- in the transport by Na^+/I^- symporter." Biochem Biophys Res Commun. 231. 731-734 (1997)

[Publications] Kosugi S, Matsuda A, Hai N, Aoki N, Sugawa H, Mori T: "Aspartate-474 in the first cytoplasmic loop of the thyrotropin receptor is crucial for receptor activation." FEBS Less. 406. 139-141 (1997)

[Publications] Mori T, Sugawa H, Kosugi S, Ueda M, Hai N, Matsuda A: "Recent trend in the management of Graves' hyperthyoidism in japan : oponion survey results, especially on the combination of therapy of antithyroid drug and thyroid hormone." Endocr J. 44. 509-517 (1997)

[Publications] Mori T, Sugawa H, Kosugi S, Ueda M, Inoue D, Akamizu T.: "Effectiveness of a short-term steroid treatment on the reduction in goiter size in antithyroid drug-treated patients with Graves' disease." Endocr J. 44. 575-580 (1997)

[Publications] Matsuda A, Kosugi S: "A homozygous missense mutation of the sodium/iodide symporter gene causing iodide transport defect." J Clin Endocrinol Metab. 82. 3966-3971 (1997)

[Publications] Muller J, Gondos B, Kosugi S, Mori T, Sheker A: "Severe testotoxicosis phenotype associated with a strongly activating mutation of the lutropin receptor." J Med Genet. (in press). (1998)

[Publications] Kosugi S, Mori T, Shenker A: "An anionic residue at position 564 is important for maintaining the inactive conformation of the human lutropin/choriogonadotropin receptor." Mol Pharmacol. (in press). (1998)

[Publications] Sugawa H, Ueda M, Matsuda A, Hai A, Yoshida A, Kosugi S: "Lack of measurable maximal capacity of inorganic iodide in non-thyroid cell." Thyroidology. (in press). (1998)

[Publications] Kosugi S, Sugawa H, Mori T: "Epitope analvsis of the thyrotropin receptor,1997." Mol Cell Endocrinol. 128. 11-18 (1997)

[Publications] 小杉眞司: "TSH受容体の構造と機能・抗原部位。" Mebio. 14. 84-91 (1997)

[Publications] 小杉眞司、松田彰、須川秀夫、森 徹: "甲状腺機能に対する喫煙産物の影響-ナトリウム・ヨードシンポーターに対する影響-" 平成8年度喫煙科学研究財団研究年報. 574-578 (1998)

[Publications] 小杉眞司: "TSH受容体異常症。" 医学のあゆみ 別冊(Basedow病と橋本病). 17-24 (1997)

[Publications] 小杉眞司: "高度先進医療における遺伝子診断。" 遺伝子医学. 1. 80-84 (1997)

[Publications] 小杉眞司、森徹: "TSH受容体。" 生体の科学. 48. 460-642 (1997)

[Publications] 小杉眞司、井上大輔、須川秀夫: "糖蛋白ホルモン受容体異常の遺伝子診断。" 公益信託臨床病理学研究振興基金研究報告書. 10. 21 (1997)

[Publications] 小杉眞司: "ヨード濃縮障害におけるヨードトランスポータ遺伝子変異。" Molecular Medicine. 35. 96-102 (1998)

[Publications] 小杉眞司: "甲状腺のヨード摂取機構。" 遺伝子医学. 2. 63-67 (1998)

[Publications] 小杉眞司: "TSH受容体遺伝子変異による疾患。" 日本臨床。別冊(受容体研究の進歩と臨床). (印刷中). (1998)

[Publications] 小杉眞司、森徹: "家族性思春期早発症。" Annunal Review内分泌・代謝1997. 54-61 (1997)

[Publications] 小杉眞司、森徹: "受容体機能とその評価法:TSH受容体" 日本臨床 特別号(現代臨床機能検査). 480-482 (1997)

小杉眞司京都大学, 医学研究科, 助手 (50252432)

[Publications] 小杉眞司、松田彰、須川秀夫、森徹: "甲状腺機能に対する喫煙産物の影響-ナトリウム・ヨードシンポーターに対する影響-" 平成8年度喫煙科学研究財団研究年報. 574-578 (1998)

[Publications] 小杉眞司: "TSH受容体異常症。" 医学のあゆみ別冊(Basedow病と橋本病). 17-24 (1997)

[Publications] 小杉眞司、森徹: "受容体機能とその評価法:TSH受容体" 日本臨床特別号(現代臨床機能検査). 480-482 (1997)