1997 Fiscal Year Annual Research Report
好塩基球・好酸球共通前駆細胞の分化・成熟におけるサイトカイン・転写因子の役割
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09671102
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
古川 達雄 新潟大学, 医学部・附属病院, 助教授 (00272849)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小池 正 新潟大学, 医学部・附属病院, 助教授 (30170161)
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| Keywords | サイトカイン / 好酸球 / 好中球 / 急性前骨髄球性白血病細胞株 |
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| Research Abstract |
1.白血病細胞株の分化誘導と分化形質発現の制御。
我々が樹立した急性前骨髄球性白血病細胞株HT93を用いATRA添加後と各種サイトカインを併用して培養し、その増殖および分化形質発現を調べた。その結果、ATRA+G-CSFの存在下では、好中球系への分化形質を有した。一方ATRA+GM-CSF、ATRA+IL3またはATRA+IL5の存在下では、8日目になると8割の細胞が好酸球様の形態を示し、このことは、eosinoperoxidaseの発現や、luxol fast blue染色のデータからも確認された。これらのデータは、血球細胞の分化においては、添加したサイトカインによって、その分化が制御されることを示唆するものと考えられた。
2.分化に特異的なシグナル伝達の解析
我々は、HT93を含んだAPL細胞株の顆粒球系分化に伴う細胞内SHP-1チロシンホスファターゼの発現の検討を行った。その結果、ATRA添加によりNB4およびHT93は顆粒球系への分化を認め、それに伴いSHP-1の発現および活性増加が認められ、顆粒球分化とSHP-1の発現および活性増加は密接に関連していると思われる。
2.分化に伴う核内転写因子の推移。
我々は、HT93にATRA+IL3の存在下で、8日目には好酸球が約8割を占める分化を確立した。その条件下での転写因子の中で、特にZinc finger motifに特異的なprimerを用いたRT-PCR法を利用した。その結果Zinc fingerの数に伴う80bpを基本としたラダーを形成したPCR産物を得た。
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