2000 Fiscal Year Annual Research Report
組み換えBCG菌を用いた非特異的・特異的癌免疫化学療法に関する研究
Project/Area Number |
09672056
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Research Institution | Nagasaki University |
Principal Investigator |
松尾 長光 長崎大学, 歯学部・附属病院, 講師 (90190412)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
内藤 真理子 長崎大学, 歯学部, 助手 (20244072)
大原 直也 長崎大学, 歯学部, 助教授 (70223930)
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Keywords | BCG / 抗原性蛋白質 / マクロファージ / ファゴゾーム / 細胞質 / 移行 / MHCクラスI / 抗腫瘍効果 |
Research Abstract |
BCG菌は直接的な抗腫瘍効果とともにマクロファージ(Mφ)を介した間接的な抗腫瘍効果も合わせ持っている.BCG菌を培養腫瘍細胞の培地中に加えると,腫瘍細胞に感染して増殖を抑制した.このときに腫瘍細胞中にはBCG菌の分泌蛋白質が確認され,抗原提示・細胞障害活性への関与が示唆された.BCG菌は細胞内寄生菌であり,菌体成分はMHCクラスII分子のみならず,MHCクラスI分子によっても宿主の細胞表面に呈示されるが,その経路はまだ不明な点が多い.BCG菌感染においては,その抗原がBCG菌が含まれるファゴゾームから細胞質に移行していることも考えられる.そこで,BCG菌をMφ(マウス由来のMφ系培養細胞:J774)に感染させ,BCG菌を含むファゴゾームと細胞質とに分離し,BCG菌の主要な分泌蛋白質の抗体を用いて,BCG菌の分泌蛋白質がMφの細胞質へ移行するか否かをウエスタンブロットで解析した.また,BCG菌の分泌蛋白質をコーティングした磁気ビーズを貪食させて同様の実験を行った. BCG菌の分泌蛋白質のうちMPB64は,ファゴゾーム中のみに検出されたが,MPB70はファゴゾーム中には認められず,細胞質中にのみ検出された.α抗原はファゴゾームおよび細胞質中にも検出されなかった.磁気ビーズにコーティングした場合は,MPB64は比較的早期に分解され,後期には検出されなかった.MPB70は後期においても細胞質中に検出された. α抗原は非常に抗原性の強い蛋白質で,ファゴゾーム中で速やかに分解され,MHCクラスII分子を介して抗原提示が行われていると考えられた.MPB64も分解速度は遅いがMHCクラスII分子を介して抗原提示が行われていると考えられた.MPB70は速やかに細胞質中に移行し,MHCクラスI分子を介して抗原提示がなされ,CD8T細胞を活性化して,細胞傷害活性が高められる可能性が示唆された.
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