1997 Fiscal Year Annual Research Report

受容体型チロシンキナーゼErbBの新規リガンドの機能解析

Research Project

Project/Area Number	09680620
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	東山繁樹大阪大学, 医学部, 助手 (60202272)
Keywords	ErbB チロシンキナーゼ / EGF ファミリー / Neuregulin / NTAK
Research Abstract	新規ErbBリガンドを同定する目的で、ジャクスタクリンアッセイ系を用いてErbB2またはErbB4を活性化するリガンドを発現している細胞株をまずスクリーニングしラットPC-12細胞株を得た。この細胞を用いてPCRクローニングを行い2580bpによりコードされる860個のアミノ酸からなると推定される、Neuregulinと約30%の相同性を持つ新規の蛋白質NTAK(Neural-and Thymus-derived Activator for erbB kinases)を同定した。このcDNAをCHO細胞にトランスフェクションしリコンビナントたんぱくしつを作成し、生物活性を解析した結果、ErbB3とErbB4に結合しErbB2を活性化する事が明らかとなった。また、これら3種のErbBを発現しているヒト乳癌細胞株MDA-MB-453細胞を分化させることが明らかとなった。一方、ラット組織でのmRNAの発現はNorthern Blottingによる解析では、脳と胸腺にのみ認められた。また、PCR法によりNTAKアイソフォームを解析した結果、NTAKの機能ドメインと考えられるEGFドメインに3種類の選択的スプライシングアイソフォームの存在が確認され、α,β,γアイソフォームと命名した。これら3種のリコンビナント蛋白質を大腸菌発現系で作成し、それぞれのErbBの活性化能を解析した。その結果、αはErbB3に、βはErbB4に対して親和性が高く、またγは、ErbB3と4を活性化しないことが明らかとなった。現在γアイソフォームがα,βアイソフォームのアイタゴニストとして機能するのかどうか解析している。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Nishi,E.: "Lysophosphatidylcholine increases expression of hwparin-binding epidermal growth factor-like growth factor in human T-lymphocytes" Circ.Res.80. 638-644 (1997)
[Publications] Miyoshi,E.: "Membrane anchored heparin-binding EGF-like growth factor acts as a tumor survival factor in hepatoma cell lines" J.Biol.Chem.272. 14349-14355 (1997)
[Publications] Che,W.: "Selelctive Induction of heparin-binding EGF-like growth factor by methylglyoxal and 3-deoxyglucosone in rat aortic smooth muscle cells" J.Biol.Chem.272. 18453-18459 (1997)
[Publications] Inui,S.: "Growth of cultured normal human keratinocytes is mediated by membrane anchored heparin-binding EGF-like growth factor and amphiregulin in associated with CD9" J.Cell.Physiol.171. 291-298 (1997)
[Publications] Higashiyama,S.: "A novel brain-derived member of the EGF family that interacts with ErbB3 and ErbB4" J.Biochem.122. 675-680 (1997)
[Publications] Kaneto,H.: "Expression of HB-EGF during pancreas development : a potential role of PDX-1 in the transcreptional activation" J.Biol.272. 29137-29143 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

受容体型チロシンキナーゼErbBの新規リガンドの機能解析

Principal Investigator

東山 繁樹 大阪大学, 医学部, 助手 (60202272)

Research Products

[Publications] Nishi,E.: "Lysophosphatidylcholine increases expression of hwparin-binding epidermal growth factor-like growth factor in human T-lymphocytes" Circ.Res.80. 638-644 (1997)

[Publications] Miyoshi,E.: "Membrane anchored heparin-binding EGF-like growth factor acts as a tumor survival factor in hepatoma cell lines" J.Biol.Chem.272. 14349-14355 (1997)

[Publications] Che,W.: "Selelctive Induction of heparin-binding EGF-like growth factor by methylglyoxal and 3-deoxyglucosone in rat aortic smooth muscle cells" J.Biol.Chem.272. 18453-18459 (1997)

[Publications] Inui,S.: "Growth of cultured normal human keratinocytes is mediated by membrane anchored heparin-binding EGF-like growth factor and amphiregulin in associated with CD9" J.Cell.Physiol.171. 291-298 (1997)

[Publications] Higashiyama,S.: "A novel brain-derived member of the EGF family that interacts with ErbB3 and ErbB4" J.Biochem.122. 675-680 (1997)

[Publications] Kaneto,H.: "Expression of HB-EGF during pancreas development : a potential role of PDX-1 in the transcreptional activation" J.Biol.272. 29137-29143 (1997)

東山繁樹大阪大学, 医学部, 助手 (60202272)