1997 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
09770217
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
土田 邦博 京都大学, 大学院・医学研究科, 助手 (30281091)
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Keywords | TGFβ / アクチビン / 多能性幹細胞 / 受容体型セリン・キナーゼ / 分化誘導 |
Research Abstract |
TGFβ型受容体セリン・キナーゼの細胞外領域とヒトIgG定常領域のキメラ蛋白を3種類作製・精製し、機能阻害活性を検討した。TGFβタイプII受容体・ヒトIgGキメラ蛋白(TGFβRII-IgG)は、培養血管内皮細胞において、5ng/mlのTGFβによる細胞外基質蛋白の転写活性誘導を50ng/mlで完全に抑制した。BMPタイプIA受容体-ヒトIgG(ALK3-IgG)は、MC3T3-E1(骨芽細胞)、PA6(脂肪前駆細胞)等の骨、軟骨、脂肪細胞等の多分化能細胞において、20ng/mlのBMP4によるアルカリ・フォスファターゼ活性誘導を濃度依存性に抑制し、1mg/mlで完全に阻害する活性を有していた。一方、アクチビンタイプIB受容体-ヒトIgG(ALK4-IgG)は、アクチビンによる転写活性には、影響を与えなかった。 未分化多能性幹細胞(ES細胞)から細胞外基質蛋白でコートしたシャーレの使用やストローマ細胞株OP9との共培養により、Flk-1(fatal liver kinase-1)陽性の血液細胞、血管内皮前駆細胞を誘導する実験系を開発したが、BMP4が、この系において、細胞増殖を阻害することにより、分化誘導を制御することを見いだした。 ラットにおいて脳組織、特に、前脳、基底核、小脳で高い発現が見られる、新規受容体型セリン・キナーゼを同定した。 アクチビンの細胞内情報伝達とその負の制御機構を検討し、細胞外から、follistatin 315,288,inhibinが、細胞内においては、Smadファミリーの内、Smad7が、アクチビンによる転写活性を抑制することを見出した。follistatin315,288の阻害活性濃度(ED50)は、1オーダー程度異なっており、その機序を検討中である。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] 土田邦博, 他: "TGFβファミリーの新規タイプI受容体セリン・スレオニン・キナーゼのラット脳からのクローニング" Mol.Cel.Neurosci.7. 467-478 (1996)
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[Publications] 片岡宏, 他: "マウス染色体5番にクラスターを形成しているPDGFα受容体,c-KIT,Flk-1は、異なった中胚葉細胞集団を規定する。" Dev.Growth.Differentiation. 39. 729-740 (1997)
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[Publications] 吉田尚弘, 他: "PDGF受容体ファミリーに属する受容体型チロシン・キナーゼの作用部位としての造血系組織" Comparative Immunology. 印刷中. (1998)
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[Publications] 土田邦博, 他: "Inhibin,Activin and Follistatin Regulatory Functions in System and Cell Biology" Springer-Verlag New York,Inc.(印刷中), (1997)
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[Publications] Vale,W.et al.: "Inhibin,Activin and Follistatin Regulatory Functions in System and Cell Biology" Springer-Verlag New York,Inc.(印刷中), (1997)