2009 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
09J02475
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
三好 知一郎 The University of Tokyo, 大学院・総合文化研究科, 特別研究員(PD)
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Keywords | 多様性 / 相同組換え / 減数分裂 / Spo11 / 相同染色体 |
Research Abstract |
我々真核生物の多様性は、配偶子形成過程における減数分裂を通して、父親と母親由来の染色体DNAを混ぜ合わせることで、保証されている。この混ぜ合わせは、広く保存されたDNA切断酵素Rec12/Spo11蛋白質が染色体上の特定の領域(ホットスポット)に結合することで、DNAの切断が起こり、相同組換えというメカニズムを利用して開始される。しかし、この酵素がどのような分子機構で染色体に結合し、活性化されるのかよく分かっていない。本研究は、モデル系として優れた分裂酵母を用いてRec12/Spo11複合体を生化学的に抽出し、その構成要素を質量分析によって同定し、その制御機構を明らかにし、真核生物における普遍的な多様性獲得のメカニズム解明に寄与するものである。本年度は、Rec12/Spo11を中心とした相同組換え開始酵素複合体のプロテオミクス解析から着手した。これまでに"Rec12/Spo11を始め、減数分裂の組換えに関与すると思われる数種類の蛋白質にエピトープタグを付加した株を作製し、同調的に減数分裂を誘導する系においてこれらの蛋白質を安定に発現する系を確立し、蛋白質複合体の精製を行った。その結果、分裂酵母とは遺伝的に遠位に位置する生物種、出芽酵母において発見されたSpo11結合因子を含め、複数の蛋白質が同定された。さらに詳しく調べたところ、これらの複合体にはRec12/Spo11を中心とした複合体と、これとは異なる複合体の2種類の複合体が協調してDNA切断を行っている可能性が浮上してきた。現在、これらの複合体の時空間的相互作用について解析をすすめ、DNA切断の開始メカニズムを明らかにする予定である。
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Research Products
(1 results)