2010 Fiscal Year Annual Research Report
血液型病原菌の感染予防を目指した血液型乳酸菌の消化管付着性機構の解明に関する研究
Project/Area Number |
09J05525
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Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
渡辺 真通 東北大学, 大学院・農学研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | ABO式血液型抗原 / ABCトランスポーター / ヒト大腸ムチン / ヒストン / 付着 / 消化管 / 乳酸菌 / プロバイオティクス |
Research Abstract |
申請者の所属する研究室で発見された血液型乳酸菌は病原菌の感染防御を目的とした機能性食品への応用に期待されるが、その基礎として重要な消化管付着性機構は十分に解明されていない。これまでに血液型乳酸菌の付着因子としてシステイン結合性ABCトランスポーターの構成タンパク質(Lam29)を同定し、ムチン層に発現する血液型糖鎖抗原に高い付着性を示すことを明らかにしている。しかし、最近の研究では本タンパク質が血液型抗原だけでなく、他のムチン層成分にも結合する可能性が示唆されている。本年度では以下の2点を明らかにした。1、ビオチン標識したLam29と腸管ムチン層成分との結合をウエスタンブロット法により分析したところ、本タンパク質は腸管ムチン層の17-,18-および31-kDaタンパク質と結合し、18-Daタンパク質に最も強い結合性を示した。組換え体を用いた付着性試験においてもLam29との付着性が認められることから、本タンパク質が新規の宿主受容体様成分であることを発見した。本結果は、他の研究成果とともに原著論文に纏め、平成23年度内に学術誌に投稿する予定である。2、カラムクロマトグラフィーにより精製したLam29を様々な酵素もしくは化学物質を用いて処理し、SDS-PAGE分析を行った。その結果、DMSO-塩酸-臭化シアン処理によるトリプトファニル結合の切断によりに8つの断片化ペプチドを取得することができた。現在、それぞれの分解断片のHPLCによる分離を精査している。平成23年度では、HPLCにより分離・精製した断片ペプチドを用いて血液型抗原やヒストンタンパク質への認識部位を絞り込み、さらにアミノ酸置換などを行うことで詳細な結合部位を特定する予定である。
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Research Products
(6 results)
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[Presentation] Discovery of a new adhesin-like protein from Lactobacillus mucosae ME-340 with binding activity to human blood group A and B antigens2010
Author(s)
M.Watanabe, H.Kinoshita, M.Nitta, R.Yukishita, M.Haruta, K.Eguchi, Y.Kawai, K.Kimura, N.Taketomo, K.Miura, A.Horii, H.kitazawa, T.Saito
Organizer
第14回アジア・大洋州畜産学会議(AAAP)
Place of Presentation
台湾・屏東
Year and Date
20100823-20100827
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[Presentation] Search for new Bifidobacterium adhesins with specific binding activity to human colonic mucin2010
Author(s)
R.Yukishita, M.Watanabe, M.Nitta, H.kinishita, Y.Kawai, K.Miura, A.Horii, J.Z.Xiao, T.Yaeshima, K.Iwatsuki, H.Kitazawa, T.Saito
Organizer
第14回アジア・大洋州畜産学会議(AAAP)
Place of Presentation
台湾・屏東
Year and Date
20100823-20100827
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[Presentation] A new method to screen for lactobacilli adhesive to human colonic mucin2010
Author(s)
H.kinishita, S.Imoto, Y.Suda, M.Ishida, M.Watanabe, M.Nitta, R.Yukishita, Y.Kawai, K.Miura, A.Horii, T.Saito
Organizer
日本乳酸菌学会2010年度大会
Place of Presentation
仙台
Year and Date
20100726-20100727