1998 Fiscal Year Annual Research Report
がん細胞の接着が誘発する血管内皮細胞間隙の開裂に関わるシグナル伝達分子の探索
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10152237
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
田中 稔之 大阪大学, 医学部, 講師 (30217054)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
宮坂 昌之 大阪大学, 医学部, 教授 (50064613)
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| Keywords | がん転移 / 接着分子 / CD44 / 信号伝達 / 高内皮細静脈(HEV) / 3'末端特異的cDNAライブラリ / transmigration / 遺伝子発現プロフィル |
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| Research Abstract |
【1】 キメラCD44を用いた新しい接着シグナルの検出系の確立とCD44の機能的エピトープの解析:CD44の細胞内領域にFasのdeath domainを含む細胞内領域を連結したキメラ分子をCD44を発現しないAKR-1細胞に遺伝子導入し、CD44の接着シグナルを細胞死へ変換する新しい検出系を確立した。この検出系とCD44の異なるエピトープに対する単クローン抗体(mAb)を用いて、CD44のシグナル形成に関与する細胞外領域の特定を試みた。その結果、LyS49を含むCD44のヒアルロン酸結合に関連するエピトープを認識するmAbおよびPro108/Thr113を含むエピトープに対するmAbにアポトーシス誘導活性が認められた。
【2】 血管内皮細胞に発現しtransmigrationを制御する信号伝達分子の検索:
リンパ節の高内皮細静脈(HEV)はその表面に接着した細胞を高率にtransmigrateさせる特徴をもつ。そこで、精製したHEVから3′末端特異的cDNAライブラリを作製し、各々約1,500クローンの塩基配列(gene、signature:GS)の決定とGSの出現頻度解析を通じてHEVの「遺伝子発現プロフィル」を得た。また、CD31^+内皮細胞やリンパ球を含む他のライブラリの解析リストとの比較およびデータベース検索を通じてHEV特異的遺伝子の探索を試みた。その結果、HEVにはendoglinやCD34などの既知の内皮細胞マーカーに加え、炎症反応に関連する遺伝子などの発現が認めれられた。またHEVに選択的に検出された既知遺伝子のうち、出現頻度の高いmac25/TAFについてin situハイブリダイゼーションを行ったところ、HEVに選択的にシグナルが検出された。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] K.Goda et al.: "Characterization of an apparently conserved epitope in E-and P-selectin identified by dual-specific monoclonal antibodies" Eur.J.Immunol.(in press).
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[Publications] Z.Luo et al.: "Analysis of the mode of action of a novel immunosuppressant FTY720 in mice" Immunopharmacol.(in press).
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[Publications] Y.Ohta et al.: "Direct antigen presentation through binding of donor ICAM-1 to recipient LFA-1 molecules in xenograft rejection" Transplantation. 65. 1094-1100 (1998)
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[Publications] T.Iizuka et al.: "Cloning and characterization of the rat MAdCAM-1 cDNA and gene" Biochim.Biophys.Acta.1395. 266-270 (1998)
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[Publications] S.Tsuzuki et al.: "Intracellular signal-transducing elements involved in transendothelial migration of lymphoma cells" Jpn.J.Cancer Res.89. 571-577 (1998)
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[Publications] S.Tsuzuki et al.: "FK506 (tacrolimus) inhibits extravasation of lymphoid cells by abrogating VLA-4/VCAM-1 mediated transendothelial migration" FEBS Letters. 430. 414-418 (1998)
