1998 Fiscal Year Annual Research Report
雌雄異株植物を用いた性染色体と生殖器官特異的遺伝子群に関する分子細胞学的解析
Project/Area Number |
10158203
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
酒井 敦 東京大学, 大学院・理学系研究科, 助手 (30235098)
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Keywords | 雌雄異株植物 / 性決定 / 生殖器官 / 性染色体 / マイクロダイセクション / FISH / メランドリウム(Silene latifolia) |
Research Abstract |
本研究の目的は、性染色体をもちXY型の性決定を行う雌雄異株植物メランドリウム(ヒロハノマンテマ、Silenelatifolia)を用いて生殖器官形成に関わる遺伝子群を単離・同定すると同時に、高等植物の性染色体にコードされる遺伝子群が生殖器官形成に果たす役割を明らかにすることである.特に、雄にしか存在しないY染色体は性決定において重要な役割を担っていると考えられるので、本研究では雄性生殖器官特異的に発現される遺伝子群およびY染色体特異的遺伝子群に解析を集中した.今年度の成果は以下のとおりである. (1) レーザーマイクロダイセクションを用いて単離されたY染色体由来の高度反復配列のひとつ、RMY1(repetitive sequence in microdissected Y chromosome)は、チェコのグループがマイクロダイセクションによりメランドリウムX染色体から単離したサプテロメア様配列X43.1に高いホモロジーを示した.FISH解析の結果、RMY1は常染色体を含む多数の染色体末端部分に局在を示したが、性染色体間では局在様式が異なっていた(X染色体は両端、Y染色体は一方の末端).この配列は性染色体の異型化を考察する上で有用な指標になると考えられる. (2) 10merのプライマーを用いて雌雄ゲノムDNAを鋳型とするRAPD解析を行い、雄DNAから特異的に増幅されてくるDNA断片を得た,ゲノミックサザンハイブリダイゼーションにより雄特異性を検討し、最も雄特異性が高いと思われたクローンについてSTS化を行い、雄特異的に単一のバンドが増幅されることを示した.inverse PCRにより、その周辺領域の取得を試みたところ、逆転写酵素様のタンパク質をコードし得るORFを含む約9.6kbpのクローンを得た.この配列はY染色体DNAのマーカーとして有用であるとともに、Y染色体特異的遺伝子の有力な候補である.
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Nagata N et al.: "Decrease in mitochondrial DNA and concurrent increase in plastid DNA in generative cells of Pharbitis nil during pollen development." Eur.J.Cell Biol.(in press). (1999)
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[Publications] Matsunaga S et al.: "Semi-automatic laser beam microdissection of the Y chromosome and analysis of Y chromosome DNA in dioecious plant,Silene latifolia." Plant Cell Physiol.40. 60-68 (1999)
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[Publications] Saito C et al.: "A high density of rRNA in the generative cells and sperm cells of pollen grains of five angiosperm species." Cytologia. 63. 293-300 (1998)
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[Publications] Sakai A et al.: "Transcriptional activities of the chloroplast-nuclei and proplastid-nuclei isolated from tobacco exhibit different sensitivities to tagetitoxin:Implication of the presence of distinct RNA polymerases." Plant Cell Physiol.39. 928-934 (1998)
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[Publications] Sakai A et al.: "Comparative analysis of plastid gene expression in tobaco chloroplasts and proplastids:Relationship between transcription and transcript accumulation." Plant Cell Physiol.39. 581-589 (1998)
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[Publications] Saito C et al.: "Detection and quantification of rRNA by high-resolution in situ hybridization in pollen grains." J.Plant Res.111. 45-52 (1998)