胚中心B細胞に再発現するRAG遺伝子産物によるV(D)J再構成とその意義の解明

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10167213
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 大森 斉 岡山大学, 工学部, 教授 (70116440)
• Keywords: 胚中心 / 成熟B細胞 / RAG遺伝子 / V(D)J再構成 / インターロイキン7

Research Abstract

免疫グロブリン遺伝子のV(D)J recombinaseであるRAG-1,RAG-2はpro-B,pre-B細胞段階で発現しV(D)J再構成を行うが、成熟B細胞になるとその発現が停止しており、一度確定したV(D)Jの構成はその後の分化段階で保持されると考えられてきた。しかし、我々はin vitroでanti-CD40/IL-4で刺激したマウス成熟B細胞や、免疫したマウスリンパ節の胚中心(GC)B細胞にRAGが再発現してくることを見いだした。in vitro,in vivoにおいてRAG-1,RAG-2が再発現する条件で、Vλ1-Jλ1再構成の結果生じるcircular excision productが検出されたことから、再発現するRAGはV(D)J recombinaseとして活性であることが示された。このexcisionproductはリンパ節の胚中心内で主に生成していることがin situ PCRにより確認された。RAGの誘導に関与するサイトカインの解析から、IL-4以外にIL-7が同等の誘導活性を示すことを見いだした。また、成熟B細胞においても抗CD40とIL-7で刺激するとIL-7レセプターが発現してくることも発見した。IL-4(-/-)マウスでは免疫後のRAGの発現は正常であったが、抗IL-7R mAbを投与したマウスではその発現が強く抑制されたことから、in vivoではIL-7がより重要な役割を持つことが示唆された。抗IL-7R mAb投与によりGC形成が非特異的に抑制されることはなかった。抗IL-7R mAbを投与する我々の方法は、in vivoにおける特異的なRAG発現抑制方として極めて有用と考えられる。現在この方法を用いてGCにおけるRAG発現の生理的意義について解析を進めている。

Research Products

• [Publications] Masaki Hikida: "Rerrangement of λ light chain genes in mature B cells in vitro and in vivo. Function of reexpressed recombination-activating gene(RAG) products." Jornal of Experimental Medicine. 187・5. 795-799 (1998)
• [Publications] Hiroshi Ohmori: "Expression and function of recombination activating genes in mature B cells." Critical Reviews in Immunology. 18・3. 221-235 (1998)
• [Publications] Masaki Hikida: "Expession of recombination activating in germinal center B cells : involement of interleukin 7 (IL-7) and the IL-7 receptor." Jornal of Experimental Medicine. 188・2. 365-372 (1998)
• [Publications] 疋田正喜: "成熟B細胞における免疫グロプリン遺伝子再構成" Annual Review免疫. 14-20 (1999)