2000 Fiscal Year Annual Research Report
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10480170
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| Research Institution | University of Tokushima |
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Principal Investigator |
杉野 弘 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 教授 (50211305)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小倉 裕範 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 助手 (60304557)
中村 隆範 香川医科大学, 医学部, 教授 (70183887)
土田 邦博 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 助教授 (30281091)
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| Keywords | アクチビン / フォリスタチン / ARIP / PDZドメイン / WWドメイン / β-カテニン / FLRG |
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| Research Abstract |
TGF-βファミリーに属するアクチビンの作用の分子基盤を明確にするために、特にそのシグナル伝達機構に検討を加えている。最近、アクチビン受容体IIAの細胞内領域と会合するPDZドメインやWWドメインをもつ分子群ARIPを単離することに成功した。さらに、フォリスタチン(アクチビン結合蛋白質)ドメインをもつFLRGを発見し、細胞外でアクチビンのシグナルを調節する分子として働いていることを見いだした。本課題では、アクチビンのシグナル伝達系がARIPやFLRGにより制御される機構について検討を加えた。
1.ARIPによる細胞内での制御機構
Smad3を強制発現させるとマウス海馬細胞HT22はアクチビン応答性を獲得するが、ARIP1を同時に過剰発現させるとアクチビン応答性を失った。さらに、ARIP1がそのC末側のPDZドメインを介してβ-カテニンと結合することが分かった。ARIP1を過剰発現させるとβ-カテニンの核移行が完全に阻害された。このような結果は、ARIP1が神経シナプスにおいてアクチビン/Smad系とWnt/β-カテニン系のクロストークに関わる分子として機能していることを強く示唆している。
2.FLRGによる細胞外での制御
2個のフォリスタチンドメイン(アクチビンなどの増殖因子結合モチーフ)をもつFLRGはアクチビン以外にBMPとも弱いながら結合能を有し、BMPの活性を阻害することが分かった。FLRGの発現調節機構を明らかにするために、プロモーター解析を行った。単離した2.6kbのプロモーター領域には、転写因子GATA、SP1、Smad、NF-kappa Bの結合部位が複数個存在した。種々のプロモーターの欠損コンストラクトを解析した結果、近位の700bpで十分な転写活性を示し、主としてSmadやNF-kappaBによりFLRGの発現が調節されていることが示唆された。
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[Publications] Tsuchida,K. et al.: "Identification and characterization of a novel follistatin-like protein as a binding protein for the TGF-β family."J.Bjol.Chem.. 275. 40788-40796 (2000)
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[Publications] Shoji,H. et al.: "Identification and characterization of a PDZ protein that interacts with activin type II receptors."J.Biol.Chem.. 275. 5485-5492 (2000)
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[Publications] Sumitomo,K. et al.: "Expression of a TGF-β1 inducible gene, TSC-36, causes growth inhibition in human lung cacer cell lines."Cancer Letters. 155. 37-46 (2000)
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[Publications] Tamura,N. et al.: "Effect of activin on production and secretion of prolactin and growth hormone in cultured rat GH3 cells."Euro.J.Endocrinol.. 142. 506-511 (2000)
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[Publications] Satoh,M. et al.: "Activin promotes astrocytic differentiation of a multipotent neural stem cell line and an astrocyte progenitor cell line from murine central nervous system."Neurosci.Lett.. 284. 143-146 (2000)
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[Publications] Florio,P. et al.: "Activin A stimulates insulin secretion in cultured human pancreatic islets."J.Endocrinol.Invest.. 23. 231-234 (2000)
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[Publications] de Groot,E. et al.: "Expression patterns of follistatin and two follistatin-related proteins during mouse development."Int.J.Dev.Biol.. 44. 327-330 (2000)
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[Publications] Hashimoto,O. et al.: "Differentiation between follistatin isoforms in the inhibition of activin signalling. Activin neutralizing activity of follistatin isoforms is dependent on their affinity for activin."Cellular Signalling. 12. 565-571 (2000)
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[Publications] Sugino,H. et al.: "Activin and Follistatin. In Skeletal Growth Factors"Lippincott Williams & Willkins, Philadelphia. 13 (2000)
