1998 Fiscal Year Annual Research Report
動脈硬化進展におけるHDL結合蛋白(HB_2)の生理学的意義の検討
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10671083
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Research Institution | Jikei University School of Medicine |
Principal Investigator |
蔵田 英明 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (00287228)
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Keywords | 高脂血症 / 動脈硬化 / 糖尿病 / 高比重リポ蛋白(HDL) / リポ蛋白受容体 |
Research Abstract |
Wistar ratの肺より調整したmRNAよりcDNAライブラリーを合成し、これを鋳型として、ラットHB_2のcDNAシークエンスの一部を参考に作成した2種類の一対のプライマー(296-315/837-856、570-589/1150-1169)を用いてPCRを行い、目的のDNAフラグメントを増幅後、TA cloning kitにてサブクローニングし、ジデオキシ法にて、このDNAフラグメントのシークエンスを行い、塩基配列に誤りのないことを確認した上で精製し、2種類のラットHB_2DNAプローブ(296-856、570-1169)を作成した。 次に、16-20週齢のWistar雄性ラットを屠殺し、肝、腎、心、肺、脳、骨格筋および脂肪組織を摘出後、グアニジン・チオシアネート-ホットフェノール法を用いて各組織のRNAを抽出し、HB_2DNAプローブを用いたノーザンブロット解析にて正常ラットにおけるHB_2の発現を検討した。HB_2は、肺、脳に強く、肝、腎にも弱いながら発現が認められた。 さらに、8-12週齢(BW220-250g)Wistar雄性ラットをstreptozotcin 40mg/kgを尾静脈より投与し糖尿病とし、この糖尿病ラットに4%コレステロール、1%コール酸含有高脂肪食を1ヶ月間摂取させた後に屠殺し、肝、腎、心、脳、肺、小腸、筋肉の臓器の摘出と血清脂質レベルを測定した。血清総コレステロールレベルの平均値は、正常群75±7mg/dlに対し、糖尿病群129±19mg/dl、高脂肪食群664±112mg/dlそして糖尿病+高脂肪食群では1164±112mg/dlと高脂肪食負荷にて血清総コレステロールレベルは有意に増加した。
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Research Products
(1 results)
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[Publications] Hideaki Kurata: "A Candidate High Density Lipoprotein (HDL) Receptor,HB2,with Possible Multiple Functions Shows Sequence Homology with Adhesion Molecules" Journal of Atherosclerosis and Thrombosis. 4・3. 112-117 (1998)