1998 Fiscal Year Annual Research Report
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10671365
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| Research Institution | Kagawa Medical School |
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Principal Investigator |
田中 英城 香川医科大学, 医学部・附属病院, 講師 (30263891)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山田 賢治 香川医科大学, 医学部, 助手 (30294755)
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| Keywords | 先天奇形 / 手 / アポトーシス / 合指症 / BMP |
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| Research Abstract |
設備機器および、試薬をはじめ各種消耗品を購入した。
現在、6日目の有精卵から鶏胚の後肢の取り出し、6日鶏胚の後肢芽を0.5%トリプシン溶液で4℃で20分間処理し、可及的に表皮を剥離し、その後、上皮下結合組織を0.1%トリプシン・0.1%コラゲナーゼ溶液で37℃にて30分間処理し、細胞分散の課程である。今後さらに、これらの細胞を1.3x10_6細胞/cm2の濃度でLab Teck Charmberプレートに撒き、10%Fetal Bovine Serum(FBS)と抗生物質(ペニシリン;100U/ml、ストレプトマイシン;100ul/ml)を含むα-MEM培地で培養する。培養1日目に500ng/mlの濃度のrhBMP-2を添加し、さらに2〜4日間培養後、アルカリフォスファターゼ(ALP)染色、アルシャンブルー染色を施し、軟骨細胞への分化を検討する。また、アポトーシスの同定はTUNEL法を用いて行う予定である。
その後、指間間充織とそれ以外の組織に分離し、別々に培養する。上記と同様の処理の後、これらの細胞の分化とアポトーシスに及ぼすBMP-2あるいはBMP-4の作用を解析することによって、合指症の発生メカニズムの解明へとつなげる。
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