1998 Fiscal Year Annual Research Report

がん細胞における酸化的リン酸反応と解糖系の共役を担うポーリンの機能解析

Research Project

Project/Area Number	10672042
Research Institution	The University of Tokushima
Principal Investigator	篠原康雄徳島大学, 薬学部, 助教授 (60226157)
Keywords	ポーリン / エネルギー代謝 / 酸化的リン酸化 / ミトコンドリア / 解糖系 / 抗がん剤
Research Abstract	申請者らはこれまでの研究で,がん細胞では多量に発現したII型へキソキナーゼがミトコンドリアに結合して,解糖活性の亢進に寄与していることをつきとめてきた. 本研究では,がん細胞に発現したポーリンの同定とそのキャラクタリゼーションを目的とした研究を行った.ポーリンには,少なくとも3種のアイソフォームが存在することが知られているが,がん細胞では,これら全てのアイソフォームが発現しているらしいことをつきとめ,うち2つのアイソフォーム,VDAC1およびVDAC2の構造の決定を行った.VDAC2には,N末の異なるバリアントの存在が報告されていたが,これまでの研究で,がん細胞では単一のタンパク質の発現が確認された. また,これらのcDNAが,実際に機能的なポーリンをコードしているかどうかを明らかにするために,在性のポーリンをコードする遺伝子を破壊させた酵母を用い,機能相補能の解析を行った.その結果,VDAC1,VDAC2とも,ポーリンとして機能するが,酵母では,酵母のポーリンよりも機能回復能が劣ることが明らかになった. ポーリンは基本的にはミトコンドリア外膜に存在するとされているが,細胞膜やSRでの発現の可能性も提唱されている.また,メッセージの解析だけでは,実際にミトコンドリア膜上に存在するかどうかを議論することは困難である.そこで,抗体を調製し,ウエスタンによる解析も行った.その結果,主としてミトコンドリア膜に存在するアイソフォームは,VDAC2であることを明らかにした.

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] E.Majima et al.: "Binding of the Fluorescein Derivative Eosin Y to the Mitochondrial ADP/ATP Carrier:Characterization of the Adenine Nucleotide Bineding Site" Biochemistry. 37-1. 424-432 (1998)
[Publications] M.Hsshimoto et al.: "Fluctuation of the First Loop Facing the Matrix of the Mitochondrial ADP/ATP Carrier Dedeuced from Internolecular Cross-Linking of Cys Residues by Bifunctional Dimaleimides." Biochemistry. 38-3. 1050-1056 (1998)
[Publications] Y.Shinohara et al.: "Quantitative deteminations of the steady state transcript levels of hexokinase isozymes and glucose transporter isoformas in normal rat tissues and the malignant tumor cell line AH130" Biochim.Biophys.Acta. 1368. 129-136 (1998)
[Publications] Y.Shinohara et al.: "Cationic uncouplers of oxidative phosphorylation are inducers of mitochondnal permeability transition" FEBS Letters. 428. 89-92 (1998)
[Publications] K.Abe et al.: "Isolation and characterization of cDNA encoding rat heart type acetyl-CoAcarboxylase" Biochim.Biophys.Acta. 1398. 347-352 (1998)
[Publications] M.Hashimoto et al.: "Expression of the bovine heart mitochondnal ADP/ATP carrier in yeast mitochondria:significantly enhanced expression by replacement of the N-terminal region of the bovine carner by the corresponding regions of the yeast carners" Biochim.Biophys.Acta. 1409. 113-124 (1998)
[Publications] 原島秀吉、篠原康雄、際田弘志: "キャリアーによる細胞内デリバリー戦略と今後の課題" Drug Delivery System. (印刷中).

1998 Fiscal Year Annual Research Report

がん細胞における酸化的リン酸反応と解糖系の共役を担うポーリンの機能解析

Principal Investigator

篠原 康雄 徳島大学, 薬学部, 助教授 (60226157)

Research Products

[Publications] E.Majima et al.: "Binding of the Fluorescein Derivative Eosin Y to the Mitochondrial ADP/ATP Carrier:Characterization of the Adenine Nucleotide Bineding Site" Biochemistry. 37-1. 424-432 (1998)

[Publications] M.Hsshimoto et al.: "Fluctuation of the First Loop Facing the Matrix of the Mitochondrial ADP/ATP Carrier Dedeuced from Internolecular Cross-Linking of Cys Residues by Bifunctional Dimaleimides." Biochemistry. 38-3. 1050-1056 (1998)

[Publications] Y.Shinohara et al.: "Quantitative deteminations of the steady state transcript levels of hexokinase isozymes and glucose transporter isoformas in normal rat tissues and the malignant tumor cell line AH130" Biochim.Biophys.Acta. 1368. 129-136 (1998)

[Publications] Y.Shinohara et al.: "Cationic uncouplers of oxidative phosphorylation are inducers of mitochondnal permeability transition" FEBS Letters. 428. 89-92 (1998)

[Publications] K.Abe et al.: "Isolation and characterization of cDNA encoding rat heart type acetyl-CoAcarboxylase" Biochim.Biophys.Acta. 1398. 347-352 (1998)

[Publications] 原島秀吉、篠原康雄、際田弘志: "キャリアーによる細胞内デリバリー戦略と今後の課題" Drug Delivery System. (印刷中).

篠原康雄徳島大学, 薬学部, 助教授 (60226157)