1998 Fiscal Year Annual Research Report

発生工学的手法を用いた日と白血病モデルマウスの作製

Research Project

Project/Area Number	10877154
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	三谷絹子東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (50251244)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	小川誠司東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (60292900) 本田浩章東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (40245064) 千葉滋東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (60212049) 平井久丸東京大学, 医学部・附属病院, 助教授 (90181130)
Keywords	白血病 / t(11;19) / ノックアウト / ノックイン / 転写因子 / RNAポリメラーゼII伸長因子 / MLL / MEN / MEN
Research Abstract	ヒト白血病モデルマウスを作製する目的で、t(11;19)(q23;p13.1)の原因遺伝子MLL/MENのノックインマウスを作製している。129SVマウスgenomic libraryをヒトMLL遺伝子のプローブでスクリーニングし、マウス遺伝子を得た。第8エクソンの下流にMLL/MENに含まれるMEN部分のcDNAをin-frameで結合させた。さらにこの下流に、ポジティブ選別用のneomycin耐性遺伝子およびリコンビネーション用のマウスMLLの第8イントロンのゲノムを繋いだ。DTA遺伝子(ネガティブ選別用)を結合させて完成させたknock-in vectorをエレクトロポレーションによりES細胞に導入し、相同組み換え体選別に成功している。今後、得られたクローンをマウス受精卵の blastocystにinjectionし、キメラマウスを得、白血病発症の有無を観察する予定である。一方、MEN(RNAポリメラーゼII伸長因子)の生物学的機能を解析する目的でノックアウトマウスを作製している。129SVマウスgenomic libraryを、ヒトMEN遺伝子をプローブとしてスクリーニングし、マウス遺伝子を得た。マウス遺伝子の第1エクソンの中にneomycin耐性遺伝子を挿入し、さらに、DTA遺伝子をマウスゲノムに結合させてMEN knock-out vectorを完成させた。ES細胞に導入し、これらのDNAを抽出した。相同組み換え領域より5'側及び3'側のゲノムプローブ及びneo遺伝子プローブを用いてサザン解析を行うことにより、2クローンの相同組み換え体を選別し得た。morula aggregationによりキメラマウスを得ることに成功している。今後、交配によりペテロマウスを得、さらにヘテロマウスの交配によりホモマウスを作製する予定である。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Kurokawa M: "The oncoprotein Evi-1 represses TGF-β signalling by inhibiting Smad3." Nature. 394. 92-94 (1988)
[Publications] Tanaka K: "The AML1/ETO(MTG8)and AML1/Evi-1 leukemia-associated chimeric oncoproteins accumulate PEBP2beta(CBFbeta)in the nucleus more efficiently than wild-type AML1." Blood. 91. 1688-1699 (1988)
[Publications] Kanda Y: "Overexpression of the MEN/ELL protein,an RNA polymerase II elongation factor,results in transformation of Ratl cells with dependence on the lysine-rich region." J Biol Chem. 273. 5248-5252 (1988)
[Publications] Hosoya N: "Frameshift Mutations of the hMSH6 Gene in Human Leukemia Cell Lines." Japanese Journal of Cancer Research. 89. 33-39 (1988)
[Publications] Hosoya N: "Mutation analysis of the WT1 gene in myelodysplastic syndromes." Japanese Journal of Cancer Research. 89. 821-824 (1988)
[Publications] Kurokawa M: "The t(3;21)fusion product,AML1/Evi-1,interacts with Smad3 and blocks TGFβ-mediated growth inhibition of mveloid cells." Blood. 92. 4003-4012 (1988)
[Publications] 三谷、平井: "Annual Review血液1998" 中外医学社, 245 (1988)
[Publications] 三谷: "造血幹細胞-分子から臨床まで-" 南江堂, 272 (1988)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

発生工学的手法を用いた日と白血病モデルマウスの作製

Principal Investigator

三谷 絹子 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (50251244)

Research Products

[Publications] Kurokawa M: "The oncoprotein Evi-1 represses TGF-β signalling by inhibiting Smad3." Nature. 394. 92-94 (1988)

[Publications] Tanaka K: "The AML1/ETO(MTG8)and AML1/Evi-1 leukemia-associated chimeric oncoproteins accumulate PEBP2beta(CBFbeta)in the nucleus more efficiently than wild-type AML1." Blood. 91. 1688-1699 (1988)

[Publications] Kanda Y: "Overexpression of the MEN/ELL protein,an RNA polymerase II elongation factor,results in transformation of Ratl cells with dependence on the lysine-rich region." J Biol Chem. 273. 5248-5252 (1988)

[Publications] Hosoya N: "Frameshift Mutations of the hMSH6 Gene in Human Leukemia Cell Lines." Japanese Journal of Cancer Research. 89. 33-39 (1988)

[Publications] Hosoya N: "Mutation analysis of the WT1 gene in myelodysplastic syndromes." Japanese Journal of Cancer Research. 89. 821-824 (1988)

[Publications] Kurokawa M: "The t(3;21)fusion product,AML1/Evi-1,interacts with Smad3 and blocks TGFβ-mediated growth inhibition of mveloid cells." Blood. 92. 4003-4012 (1988)

[Publications] 三谷、平井: "Annual Review血液1998" 中外医学社, 245 (1988)

[Publications] 三谷: "造血幹細胞-分子から臨床まで-" 南江堂, 272 (1988)

三谷絹子東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (50251244)