1999 Fiscal Year Annual Research Report

ステロイドをはじめとする低分子脂溶性活性物質レセプターの分子動態

Research Project

Project/Area Number	11470006
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Research Institution	Kyoto Prefectural University of Medicine
Principal Investigator	河田光博京都府立医科大学, 医学部, 教授 (60112512)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	森田規之京都府立医科大学, 医学部, 講師 (50239662) 西真弓京都府立医科大学, 医学部, 講師 (40295639) 小澤一史京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60169290)
Keywords	GFP / 培養細胞 / グルココルチコイドレセプター / ミネラルコルチコイドレセプター / エストロゲンレセプター / リアルタイムイメージング / 細胞質・核移行 / リガンド
Research Abstract	低分子脂溶性生理活性物質(ステロイドホルモンをはじめ、甲状腺ホルモン、ビタミンA(レチノイド)、ビタミンDさらに一群のエイコサノイドなど)の神経系における分子制御機構を明らかにするために、これらのレセプターがリガンドと結合するまでにどのような存在様式を呈しているのか、これらのレセプターとGFP(green fluorescent protein)およびその改変型蛍光タンパク(BFP,CFP,YEP)とのキメラ遺伝子を作成し、神経系培養細胞(特定領域からのニューロンとグリア)に強制発現させ、生細胞内で可視化されたレセプタータンパクの局在の特定をリアルタイムイメージング法によって追究する。GFP-GR(グルココルチコイドレセプター)、GFP-MR(ミネラルコルチコイドレセプター)、GFP-ER(エストロゲンレセプター)、さらには共役因子タンパクSRC-1,P300などを培養細胞(COS細胞、初代神経系細胞)へこれらの遺伝子を共発現させた。これらの状態においてGRやMR、ERに対するアゴニストやアンタゴニストを投与し、細胞内での蛍光特性の変化をリアルタイムイメージング法によって観察し、異なる転写因子が同一細胞でどのような立体構築的相関性を有しているのか検索した。GRやMRはリガンド依存性に細胞質から核へ移動し、その移行は微小管によらないことを明らかにした。両者の核移行は基本的に同じ時間軸で行われていることが示された。ERについては上記と異なり、リガンドがない状態においても核に分布しており、リガンド投与によって核内の分布様相に変化がみられた。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Matsushita,H.et al: "Changes in serotonergic neurons in the brain of pyrithiamine-induced acute thiamine-deficient mice"Acta Neuropathol. 98. 614-621 (1999)
[Publications] Watanabe,N.et al: "A method of tracking donor cells after simulated autologous transplantation : a study using synovial cells of transgenic rats"Cell Tissue Res.. 298. 519-525 (1999)
[Publications] Nishi M.et al: "Real-time imaging of glucocoriticoid receptor dynamics in living neurons and glial cells in comparison with non-neural cells"Eur.J.Neurosci.. 11. 1927-1936 (1999)
[Publications] Ozawa H.et al: "Down-regulation of ACTH and glucocorticoid receptor immunoreactivity in hypothalamic arcuate neurons after adrenalectomy in the rat"NeuroReport. 10. 1-5 (1999)
[Publications] Hu Z.et al: "Long-term lack of endogenous glucocorticoids down-regulates glucocorticoid receptor levels in the rat forebrain"Neuroscience. 90. 1185-1195 (1999)
[Publications] Ozawa H.et al: "Cellular localization and distribution of glucocorticoid receptor(GR)immunoreactivity and the expression of GR mRNA in the rat pituitary gland : A combined double immunohistochemistry and in situ hybridization histochemical analysis"Cell Tissue Res.. 295. 207-214 (1999)
[Publications] Kawata,M.et al: "Molecular Steroidogenesis"Universal Academy Press Inc.,Tokyo,Japan. 442 (2000)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

ステロイドをはじめとする低分子脂溶性活性物質レセプターの分子動態

Principal Investigator

河田 光博 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (60112512)

Research Products

[Publications] Matsushita,H.et al: "Changes in serotonergic neurons in the brain of pyrithiamine-induced acute thiamine-deficient mice"Acta Neuropathol. 98. 614-621 (1999)

[Publications] Watanabe,N.et al: "A method of tracking donor cells after simulated autologous transplantation : a study using synovial cells of transgenic rats"Cell Tissue Res.. 298. 519-525 (1999)

[Publications] Nishi M.et al: "Real-time imaging of glucocoriticoid receptor dynamics in living neurons and glial cells in comparison with non-neural cells"Eur.J.Neurosci.. 11. 1927-1936 (1999)

[Publications] Ozawa H.et al: "Down-regulation of ACTH and glucocorticoid receptor immunoreactivity in hypothalamic arcuate neurons after adrenalectomy in the rat"NeuroReport. 10. 1-5 (1999)

[Publications] Hu Z.et al: "Long-term lack of endogenous glucocorticoids down-regulates glucocorticoid receptor levels in the rat forebrain"Neuroscience. 90. 1185-1195 (1999)

[Publications] Kawata,M.et al: "Molecular Steroidogenesis"Universal Academy Press Inc.,Tokyo,Japan. 442 (2000)

河田光博京都府立医科大学, 医学部, 教授 (60112512)