1999 Fiscal Year Annual Research Report
破骨細胞分化誘導シグナルと骨吸収性病変におけるその異常の解明(細胞接着から分化制御遺伝子の発現に至る情報伝達機構)
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11470227
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Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
松本 俊夫 徳島大学, 医学部, 教授 (20157374)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
井上 大輔 徳島大学, 医学部, 助手 (60314853)
安倍 正博 徳島大学, 医学部, 講師 (80263812)
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| Keywords | 骨吸収 / 破骨細胞 / 骨髄腫 / 細胞分化 / 転写因子 / ケモカイン / インテグリン |
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| Research Abstract |
1.破骨細胞前駆細胞におけるsRANKLによる初期誘導遺伝子群の同定
まずtoolとしてマルトース結合タンパクとヒトRANKLの細胞外領域との融合タンパクを作成・精製した.このMBP-hsRANKLは確かにマウス脾細胞をM-CSFの存在下で破骨細胞に分化させた.次にsRANKによりマウス脾細胞および破骨細胞前駆細胞株C-7を4時間刺激し,精製したpolyA^+RNAと非刺激controlとのdifferential displayを行うことより幾つかの候補遺伝子を同定した.現在,これらの遺伝子の発現誘導の確認およびシークエンスを進めている.このように未知の標的遺伝子の同定を進める一方,破骨細胞分化に重要あることが知られている転写因子AP-1およびMITFの発現変化に関しても,検討している.また転写因子モチーフをもとにしたprimerによりsuppression PCR法を行い,RANKLの標的転写因子の選択的なサーチも行っている.
2.骨髄腫細胞(MM)による破骨細胞分化促進作用の検討
MMによる破骨細胞分化促進作用の大部分はMMが産生するMIP-1により説明し得ることが明らかとなった.またMMまたはMIP-1による破骨細胞分化促進作用はMMの発現するVLA-4または骨髄間質細胞が発現するそのリガンドVCAM-1に対する中和抗体で抑制されたことから,このintegrin作用が重要であることが示された.さらにMMあるいはMIP-1の作用はRANKLのdecoy受容体であるOPGの添加によりほぼ完全に抑制されたことから,RANKL作用に依存していた.現在,RANKLの発現あるいはVLA-4に対するMIP-1の直接作用を含めて,これらの調節因子の相互作用についての解析を進めている.
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[Publications] Ozaki S,et al.: "Humanized anti-HM1.24 antibody mediates myeloma cell cytotoxicity that is enhanced by cytokine stimulation of effector cells."Blood. 93. 3922-3930 (1999)
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[Publications] Takeda S,et al.: "Stimulation of osteoclast formation by 1,25-dihydroxyvitamin D requires its binding to vitamin D receptor (VDR) in osteoblastic cells: Studies using VDR knockout mice."Endocrinology. 140. 1005-1008 (1999)
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[Publications] Tani R,et al.: "Fas ligand-induced apoptosis of hepatocytes in natural killer cell leukaemia."British Journal of Haematoogy. 106. 709-712 (1999)
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[Publications] Suzawa M,et al.: "Extracellular matrix-associated bone morphogenetic proteins are essential for differentiation of murine osteoblastic cells in vitro."Endocrinology. 140. 2125-2133 (1999)
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[Publications] Chikatsu N,et al.: "A novel homozygous inactivating mutation of calcium-sensing receptor in an adult patient with primary hyperparathyroidism."Clinical endocrinology. 50. 537-543 (1999)
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[Publications] Hara T,et al.: "Biclonal lymphoplasmacytic imniunocytoma associated with Crohn's disease."Internal Medicine. 38. 500-503 (1999)
