2000 Fiscal Year Annual Research Report
平滑筋細胞内Ca^<2+>放出系の機能発達におけるc-kitの役割
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11670094
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| Research Institution | KUMAMOTO UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
徳冨 芳子 熊本大学, 医学部, 助手 (90253723)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
徳冨 直史 熊本大学, 医学部, 助教授 (30227582)
西 勝英 熊本大学, 医学部, 教授 (00040220)
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| Keywords | 胃平滑筋 / 細胞内Ca^<2+>貯蔵部位 / c-kit / マウス / パッチクランプ法 / fura-2 / ryanodine / caffeine |
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| Research Abstract |
平滑筋細胞の機能発達におけるc-kitレセプター型チロシンキナーゼの役割を明らかにするために,抗c-kitモノクローナル抗体(ACK2)を用い,平滑筋収縮機能の発達と細胞内Ca^<2+>シグナル系に対するc-kitの影響について,電気生理学的,薬理学的に検討した.nystatin穿孔パッチクランプ法を用い,膜電位固定下,c-kit陽性細胞から調律性のCa^<2+>依存性Cl^-電流が観察された.消化管平滑筋細胞からは自発振動性(STOCs)の,またcaffeine(I_<CAF>)及びcarbachol(I_<CCh>)誘発性のCa^<2+>依存性K^+電流が観察された.これらの電流と,fura-2による細胞内Ca^<2+>濃度測定の結果から,ACK2処置によりc-kit陽性細胞の欠落と自動能障害を起こしている消化管の平滑筋細胞では,細胞内Ca^<2+>貯蔵部位へのCa^<2+>再取り込み機能の低下があることが示唆された.STOCs及びI_<CAF>の活性化に動員されるCa^<2+>はryanodine感受性Ca^<2+>放出によって供給され,その貯蔵部位へのCa^<2+>の充填にはL型Ca^<2+>チャネルが重要な役割を果たしていることがわかった.等尺性張力測定において,caffeineは濃度依存性(0.1-3mM)に,胃平滑筋の弛緩をおこし,さらに3mM以上の高濃度になると一過性収縮に続く弛緩反応を惹起した.この弛緩応答は,高K^+あるいはcarbachol存在下で著しく加速された.以上より,ryanodine感受性Ca^<2+>放出は,マウス胃平滑筋細胞の細胞内Ca^<2+>恒常性と収縮性の重要な調節因子であること,またc-kit陽性細胞は調律的興奮とCa^<2+>-fluctuationを介して平滑筋の機能発達に重要な役割を果たしていることが示唆される.
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Research Products
(4 results)
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[Publications] Torihashi,S., et al.: "Blockade of Kit signaling induces transdifferentiation of interstitial cells of Cajal to a smooth muscle phenotype."Gastroenterology. 117. 140-148 (1999)
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[Publications] Murakami,M., et al.: "Alkalinization-induced K^+ current of mouse megakaryocyte."Jpn.J.Pharmacol.. 79. 343-350 (1999)
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[Publications] Tokutomi,N., et al.: "The effects of mexiletine on the activity of neuronal voltage-gated Na^+ channels."Jpn.Pharmacol.Ther.. 28・2. 133-141 (2000)
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[Publications] Tokutomi,Y., et al.: "The properties of ryanodine-sensitive Ca^<2+> release in mouse gastric smooth muscle cells."Br.J.Pharmacol.. (in press). (2001)
