ダブルノックアウトマウスを用いた動脈硬化におけるサイトカインの役割に関する研究

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671111
• Research Institution: Gifu University
• Principal Investigator: 藤井 秀比古 岐阜大学, 医学部, 助手 (50301213)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 和田 久泰 岐阜大学, 医学部, 助手 (10283300) ; 斉藤 邦明 岐阜大学, 医学部・附属病院, 講師 (80262765) ; 清島 満 岐阜大学, 医学部, 教授 (10171315)
• Keywords: 動脈硬化 / サイトカイン / ノックアウトマウス / TNF-α

Research Abstract

【目的】TNFα遺伝子欠損マウス(TNFα0)と動脈硬化のモデル動物として利用されているアポ蛋白E遺伝子欠損マウス(apoE0)を交配させることによって樹立したダブルノックアウトマウス(TNFα0/apoE0)を用いて、動脈硬化におけるTNF-αの役割を直接的に検討した。【方法】C57BL/6J由来のApoE0とTNFα0の交配させ、出生したマウスのtail veinより採取した血液よりDNAを抽出し、それぞれの特異的primerを用いてスクリーニングを行い、TNFα0/apoE0を樹立した。次にTNFα0/apoE0およびApoE0に対して、普通投与の上、12週間後に血清中の総コレステロール(TC)、LDL-コレステロール、HDL-コレステロール、トリグリセライド(TG)を測定し両群を比較した。血清脂質測定は自動分析法、リポ蛋白プロフィールはファルマシア社製のカラムによるHPLC法により行った。さらに両群での動脈硬化病変を病理組織学的に比較検討した。【結果および考察】血清TCは、apoE0が467±20.6(S.E.M)mg/dl、TNFα0/apoE0は536.7±28.0mg/dl、血清TGはそれぞれ54.6±5.0mg/dl、47.9【plus-minus】4.4mg/dlであったが、いずれも有意差は認められなかった。リポ蛋白プロフィールは両群ともほぼ同様のパターンを示した。HE染色による動脈硬化病変の定量ではapoE0が7.0×10^5μm^2、TNFα0/apoE0は5.1×10^5μm^2は有意な差を認めた(p<0.001)。アポ蛋白E遺伝子欠損マウスにおける動脈硬化病変の進展においては、TNFαは動脈硬化促進的に働いている。