2000 Fiscal Year Annual Research Report

細胞分化による心不全の遺伝子治療

Research Project

Project/Area Number	12136201
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (B)
Research Institution	Chiba University
Principal Investigator	小室一成千葉大学, 医学部, 助教授 (30260483)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	廣井透雄東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (30311624)
Keywords	DNA chip / P19CL6細胞 / CSX / GATA4 / MEF2C / Wnt / BMP
Research Abstract	1.DNA chipを用いた心筋細胞分化のマスター遺伝子およびCSX遺伝子の上流分子の単離心筋細胞は出生後分裂増殖能を喪失するため、心筋梗塞等で心筋細胞が失われた場合、心不全の原因となる。失われた心筋細胞を補う方法として非心筋細胞を心筋細胞に転換させる遺伝子治療法と細胞移植法があり、この方法を確立するためには、心筋細胞分化の分子機序を明らかにしていく必要がある。そこで心筋細胞に高率に分化することが知られている細胞株であるP19CL6細胞を用いて、DNA chipによりCSX遺伝子の上流分子について解析した。P19CL6細胞はDMSO添加後6日目より、CSX、GATA4、MEF2Cが発現し心筋細胞に分化するため、それ以前に発現する分子を同定しようと試みた。具体的には、分化前とDMSO添加後4日目、6日目の細胞よりRNAを抽出し、それぞれの時期に発現する遺伝子をDNA chipを用いて解析した。多くの転写因子、細胞増殖因子、細胞骨格分子などの発現に変化が認められた。今後個々の分子の心筋細胞分化における役割について解析を進める予定である。 2.心筋細胞におけるWntの役割についての研究我々は以前、P19CL6細胞の心筋細胞分化にBMPが必須であることを示したが、この際にもDMSOによる処理が必要であることから、BMP以外の因子も関与していると考えられる。ショウジョウバエの心臓の発生にwinglessが必要であることや、羽の発生においてBMPのホモログであるdppとwinglessが協調して働くことが報告されている。そこでwinglessのほ乳類ホモログであるWntのP19CL6における役割を解析した。具体的には、Wntの機能を阻害する分子としてドミナントネガティブWntとFrzbをそれぞれ過剰発現したP19CL6細胞株を単離した。二種類の細胞株はともにP19CL6よりも高率に心筋に分化した。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Zhu W: "Ca^<2+>/calmodulin-dependent kinae II and calcineurin play critical roles in endothelin-1-induced cardiomyocyte hypertrophy."J Biol Chem. 275. 15239-45 (2000)
[Publications] Aikawa R: "Insulin prevents cardiocytes from oxidative stress-induced apoptosis through actication of P13 Kinase/Akt."Circulation. 102. 2873-9 (2000)
[Publications] Shimoyama M: "Calcineurin inhabitor attenuates the development and induces the regression of cardiac hypertrophy in rats with salt-sensitive hypertension."Circulation. 102. 1996-2004 (2000)
[Publications] Wakimoto K: "Targeted disruption of Na^+/Ca^<2+> exchanger gene Leads to cardiomyocyte apoptosis and defects in heartbeat."J Biol Chem. 275. 36991-8 (2000)
[Publications] Zhu W: "Functional analyses of three Csx/Nkx-2.5 mutations that cause human congenital heart disease."J Biol Chem. 275. 35291-6 (2000)
[Publications] Saito S: "β-adrenergic pathway induces apoptosis through calcineurin activation in cardiac myocytes."J Biol Chem. 275. 34528-33 (2000)
[Publications] 池田祐一: "先端医学社"β遮断機の心臓(心筋、冠、伝導)に関する作用。β-遮断機のすべて. 5 (2000)
[Publications] 小室一成: "先端医学社"心肥大・リモデリングとアンジオテンシンII心血管系疾患とレニン・アンジオテンシン系-新世代のアンジオテンシンII受容体拮抗。. 2 (2000)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

細胞分化による心不全の遺伝子治療

Principal Investigator

小室 一成 千葉大学, 医学部, 助教授 (30260483)

Research Products

[Publications] Zhu W: "Ca^<2+>/calmodulin-dependent kinae II and calcineurin play critical roles in endothelin-1-induced cardiomyocyte hypertrophy."J Biol Chem. 275. 15239-45 (2000)

[Publications] Aikawa R: "Insulin prevents cardiocytes from oxidative stress-induced apoptosis through actication of P13 Kinase/Akt."Circulation. 102. 2873-9 (2000)

[Publications] Shimoyama M: "Calcineurin inhabitor attenuates the development and induces the regression of cardiac hypertrophy in rats with salt-sensitive hypertension."Circulation. 102. 1996-2004 (2000)

[Publications] Wakimoto K: "Targeted disruption of Na^+/Ca^<2+> exchanger gene Leads to cardiomyocyte apoptosis and defects in heartbeat."J Biol Chem. 275. 36991-8 (2000)

[Publications] Zhu W: "Functional analyses of three Csx/Nkx-2.5 mutations that cause human congenital heart disease."J Biol Chem. 275. 35291-6 (2000)

[Publications] Saito S: "β-adrenergic pathway induces apoptosis through calcineurin activation in cardiac myocytes."J Biol Chem. 275. 34528-33 (2000)

[Publications] 池田祐一: "先端医学社"β遮断機の心臓(心筋、冠、伝導)に関する作用。β-遮断機のすべて. 5 (2000)

[Publications] 小室一成: "先端医学社"心肥大・リモデリングとアンジオテンシンII心血管系疾患とレニン・アンジオテンシン系-新世代のアンジオテンシンII受容体拮抗。. 2 (2000)

小室一成千葉大学, 医学部, 助教授 (30260483)