2001 Fiscal Year Annual Research Report

膜タンパク破綻機構の解明とシェーグレン症候群の免疫制御

Research Project

Project/Area Number	12307040
Research Institution	The University of Tokushima
Principal Investigator	林良夫徳島大学, 歯学部, 教授 (00127854)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	斎藤一郎徳島大学, 歯学部, 助教授 (60147634)
Keywords	シェーグレン症候群 / 自己抗原 / α-fodrin / T細胞エピトープ / deletin mutagenesis法 / アナログペプチド / 実験的治療 / 疾患モデル
Research Abstract	研究代表者はシェーグレン症候群疾患モデルNFS/sldマウスから病因と密接に関連した責任抗原として分子量120KDの臓器特異的自己抗原を分離精製した(SCIENCE276:604,1997)。得られたN末端20残基のアミノ酸解析によりこの自己抗原蛋白は分断化された膜骨格タンパクα-fodrin断片であることが明らかとなった。そこで本研究は膜タンパクα-fodrinの破綻機構の解明により難病克服への活路を開くことを目的として実施されている。シェーグレン症候群における自己抗原120KDα-fodrin膜骨格タンパクの成立機序を解明し、痴患特異的免疫応答の制御法の確立が急務であり、本年度は、シェーグレン症候群モデルマウスやヒト患者で自己抗原が形成される機序を明らかにする目的で、生体内で起こってタンパク分断化の分子機構を解析した。口唇腺生検材料を用いた免疫組織化学法ではシェーグレン症候群患者の口唇腺導管上皮細胞にα-fodrinN末20残基に対するペプチド抗体に陽性所見がみられ、ウエスタンブロット法でも患者サンプルにのみ自己抗原に対する陽性所見が確認された。従って、腺組織破壊に関与するCD4T細胞の標的分子が唾液腺細胞膜上に存在する可能性が強く示唆される。そこで、疾患特異的なT細胞エピトープを解明する目的で、α-fodrin遺伝子全領域をカバーするpGEX発現ベクターの産生するGST fusion蛋白について制限酵素によるdeletin mutagenesis法を実施した。T細胞エピトープの決定は疾患モデル末梢またはリンパ節からT細胞を分離調整し、各種リコンビナント蛋白及び合成ペプチドとの増殖反応性で解析を実施し、シェーグレン症候群特異的なT細胞エピトープのシークエンスを明らかにした後、その責任分子のアナログペプチドを作製し、モデルマウスin vivoに投与することにより疾患特異的な実験的治療法の確立を試みた。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Tsubota, K. et al.: "Functional recovery by topical application of cyclosporin A in Siogren's svndrome mouse model"Invest. Ophthal. Vis. Sci.. 42. 101-110 (2001)
[Publications] Inoue, H. et al.: "Possible involvement of Epstein-Barr virus mediated α-fodrin cleavage for organ-specific autoantigen in Sjogren's svndrome"J. Immunol.. 166. 5801-5809 (2001)
[Publications] Kobayashi, I. et al.: "Anti-α-fodrin autoantibody is an early diagnostic marker for childhood primarv Sjogren's svndrome"J. Rheumatol.. 28. 363-365 (2001)
[Publications] Maeno, N. et al.: "Anti-α-fodrin antibodies in Sjogren's syndrome in chirldren"J. Rheumatol.. 28. 860-864 (2001)
[Publications] Ishimaru, N. et al.: "Possible role of organ-specific autoantigen for Fas ligand-mediated activation-induced cell death in murine Sjogren's syndrome"J. Immunol.. 167. 6031-6037 (2001)
[Publications] Azuma, M. et al.: "Cepharantine suppresses tumor necrosis tactor-α-induced matrix metalloproteinase-9-production by downregulating nuclear factor kB in human salivary gland acinar cells"Arthritis Rheum.. (in press). (2002)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

膜タンパク破綻機構の解明とシェーグレン症候群の免疫制御

Principal Investigator

林 良夫 徳島大学, 歯学部, 教授 (00127854)

Research Products

[Publications] Tsubota, K. et al.: "Functional recovery by topical application of cyclosporin A in Siogren's svndrome mouse model"Invest. Ophthal. Vis. Sci.. 42. 101-110 (2001)

[Publications] Inoue, H. et al.: "Possible involvement of Epstein-Barr virus mediated α-fodrin cleavage for organ-specific autoantigen in Sjogren's svndrome"J. Immunol.. 166. 5801-5809 (2001)

[Publications] Kobayashi, I. et al.: "Anti-α-fodrin autoantibody is an early diagnostic marker for childhood primarv Sjogren's svndrome"J. Rheumatol.. 28. 363-365 (2001)

[Publications] Maeno, N. et al.: "Anti-α-fodrin antibodies in Sjogren's syndrome in chirldren"J. Rheumatol.. 28. 860-864 (2001)

[Publications] Ishimaru, N. et al.: "Possible role of organ-specific autoantigen for Fas ligand-mediated activation-induced cell death in murine Sjogren's syndrome"J. Immunol.. 167. 6031-6037 (2001)

[Publications] Azuma, M. et al.: "Cepharantine suppresses tumor necrosis tactor-α-induced matrix metalloproteinase-9-production by downregulating nuclear factor kB in human salivary gland acinar cells"Arthritis Rheum.. (in press). (2002)

林良夫徳島大学, 歯学部, 教授 (00127854)