2000 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
12308042
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
岡野 栄之 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (60160694)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
澤本 和延 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (90282350)
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Keywords | ネスチン / Green Fluorescent Protein(GFP) / 脳室周囲部 / 神経幹細胞 / トランスジェニックマウス / セルソーター |
Research Abstract |
我々は、神経幹細胞のマーカーであるNestinの遺伝子のエンハンサー領域を用いて、Green Fluorescent Protein(GFP)という緑色の蛍光を発するタンパク質を神経幹細胞のみに発現させる技術を開発することに成功した. 神経幹細胞を生きた状態で同定し、これを分離することができるように、神経幹細胞で選択性高く発現しているnestin遺伝子のエンハンサー制御下で蛍光物質であるGreen Fluorescence Protein(GFP)をコードする遺伝子をおいたレポーターコンストラクト(nestin-EGFP)を作成し、これを神経組織へと導入した。nestin-EGFPレポーター遺伝子を有するトランスジェニックマウスにおいては、神経幹細胞を含む未分化な細胞が密集している脳室周囲部(Ventricular Zone,VZ)に強い蛍光が観察された。EGFP陽性の細胞をセル・ソーター法により分離したところ、マーカーの発現、多分化能、自己複製能などの指標を満たす神経幹細胞活性が濃縮できることが認められた。また、同レポーター遺伝子は、成人脳内に存在する神経幹細胞/神経前駆細胞を同定・分離する上でも有効であることを見出した。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Ayano Kawaguchi: "Nestin-EGFP transgenic mice : visualization of self-renewal and multipotency of the CNS stem cells."Molecular Cell.Neuroscience. 17. 259-273 (2001)
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[Publications] Hitoshi Sawa: "Components of the SWI/SNF complex are required for asymmetric cell division in C.elegans."Molecular Cell. 6. 617-624 (2000)
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[Publications] Akinori Yoda: "MSI-1,a neural RNA-binding protein, is involved in the male mating behavior in Caenorhabditis elegans."Genes to Cells. 5. 885-895 (2000)
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[Publications] Mamoru Shibata: "Caspase determines the vulnerability of oligodendrocytes in cerebral white matter in ischemia."The Journal of Clinical Investigation. 106. 643-653 (2000)
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[Publications] Shin Hisahara: "Caspase-11mediates oligodendrocyte cell death and pathogenesis of auto-immune mediated demyelination."Journal of experimental medicine. 193. 111-122 (2001)
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[Publications] Hideyuki Okano: "Learning and memory."Proceeding of the National Academy of Science of the United States of America. 97. 12403-12404 (2000)
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[Publications] Hideyuki Okano: "Proceeding of International workshop : Stem Cell Biology and Molecular Treatment."Sakuragawa, N.. 13 (2000)
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[Publications] Hideyuki Okano: "5th International Symposium on Tissue Engineering for Therapeutic Use"Ikada, Y.(in press). (2000)