2002 Fiscal Year Annual Research Report

新型トリポット錯体による加水分解金属酵素機能モデルの構築

Research Project

Project/Area Number	12640535
Research Institution	Ibaraki University
Principal Investigator	藤井有起茨城大学, 理学部, 教授 (50007564)
Keywords	トリポット / 金属錯体 / ペプチド / DNA / 加水分解 / TACH / 反応機構
Research Abstract	1.TACH配位子の化学修飾(N-メチル化、N-エチル化、N-ヒドロキシエチル化)に成功した。N-メチル化及びN-エチル化物のCu(II)錯体は、pBR322 DNAの切断に対して比較的高い活性を示したが、pHおよび錯体濃度効果がCu(II)TACHのものと異なるため、現在、詳細に検討中。 2.酵素法(サンガー法の活用)によるDNA切断位置決定法を新規に開発した。この方法を用いてCu(II)TACH錯体によるpUC-19DNAの切断位置(塩基配列)を決定し、Cu(II)TACHは塩基に関してほぼランダムにDNAを切断する事が判明した。 3.Cu(II)TACHによる4種DNA (pUC-19、pBR322,ΦX174、colE1)の切断を比較した結果、DNA間で切断パターンが異なり、明瞭なDNA鎖長依存性があることを見出した。このことは錯体の加水分解切断活性がDNAによって大きく変化することを意味し、錯体の活性を比較する上で非常に重要である。その原因を探るため、イオン強度効果、温度効果、freeCu(II)の効果について検討した。 4.2-アミノメチルピリジンシの化学修飾(アミノ基へのβ-シクロデキストリンの導入)に成功した。その配位子のZn(II)錯体のジペプチド加水分解能を検討した結果、70℃、pH8.1でPheSerの場合に大きな加速効果があることを見出した。 5.ジペプチドの閉環・開環および加水分解速度の測定を行い、ペプチド加水分解の基礎データを蓄積した。

Research Products
(3 results)

All Other

All Publications (3 results)

[Publications] 藤井有起他: "Copper(II)-cis, cio-1,3,5-triaminocydohexome complex-promoted hyolrolysis of dipeptides : kinetic, spociotion and structural studies"J. Biol. Inorg. Chem.. 7. 843-851 (2002)
[Publications] 藤井有起他: "Novel Approach for the Effective determination of DNA scission Site Using the Sanger Method"J. Biochem. Biophy. Methods. 52. 97-109 (2002)
[Publications] 藤井有起他: "Metal-ion-associated Hydrolysis of Dipeptides Involving a Sorine Residue in to Neutral Aqueous Solution"Org. Biomal. Chem.. 1. 629-632 (2003)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

新型トリポット錯体による加水分解金属酵素機能モデルの構築

Principal Investigator

藤井 有起 茨城大学, 理学部, 教授 (50007564)

Research Products

[Publications] 藤井有起 他: "Copper(II)-cis, cio-1,3,5-triaminocydohexome complex-promoted hyolrolysis of dipeptides : kinetic, spociotion and structural studies"J. Biol. Inorg. Chem.. 7. 843-851 (2002)

[Publications] 藤井有起 他: "Novel Approach for the Effective determination of DNA scission Site Using the Sanger Method"J. Biochem. Biophy. Methods. 52. 97-109 (2002)

[Publications] 藤井有起 他: "Metal-ion-associated Hydrolysis of Dipeptides Involving a Sorine Residue in to Neutral Aqueous Solution"Org. Biomal. Chem.. 1. 629-632 (2003)

藤井有起茨城大学, 理学部, 教授 (50007564)

[Publications] 藤井有起他: "Copper(II)-cis, cio-1,3,5-triaminocydohexome complex-promoted hyolrolysis of dipeptides : kinetic, spociotion and structural studies"J. Biol. Inorg. Chem.. 7. 843-851 (2002)

[Publications] 藤井有起他: "Novel Approach for the Effective determination of DNA scission Site Using the Sanger Method"J. Biochem. Biophy. Methods. 52. 97-109 (2002)

[Publications] 藤井有起他: "Metal-ion-associated Hydrolysis of Dipeptides Involving a Sorine Residue in to Neutral Aqueous Solution"Org. Biomal. Chem.. 1. 629-632 (2003)