新型トリポット錯体による加水分解金属酵素機能モデルの構築

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12640535
• Research Institution: IBARAKI UNIVERSITY
• Principal Investigator: 藤井 有起 茨城大学, 理学部, 教授 (50007564)
• Keywords: 金属錯体 / 銅(II) / 亜鉛(II) / DNA / ペプチド / 加水分解 / 加水分解酵素 / 切断

Research Abstract

1.Cu(II)-TACH錯体による環状DNA(pHSG398,pUC19,pBR322,φX174,colE1)の切断速度に及ぼすDNA鎖長依存性(同一bp濃度では、長鎖の方が速い)を検討し、理論式を誘導した。それに基づき、pUC19DNAは歪んだ構造をとり、特異なpH依存性を示すことが示唆された。
2.Cu(II)TACH錯体への置換基導入効果(CH_3,C_2H_5,C_3H_7)を検討し、置換基数、置換基の笠高さが増えると、錯体は単核種として存在する確率が増え、DNA切断能が向上すること、及び、錯体の歪が大きくなり、より酸性pH域でDNAを切断することが分った。
3.β-シクロデキストリン(CD)を導入した2-アミノメチルピリジンの亜鉛(II)錯体によるジペプチド(GlyGly,GlyLeu,LeuGly,PheSer,GlyPhe,PheGly)の加水分解速度を測定し、PheSerとPheGlyの加速効果が他よりも高いことを見い出し、^1HNMRからCDへの包摂を確認した。
4.水溶液中でのジペプチド(GlyGly,SerGly,GlySer,LeuGly,GlyLeu,SerMet,AlaSer,LeuSer,ValSer,GlyThr,AlaThr)の環化開環速度・平衡定数、異種ジペプチドへの変換速度・平衡定数、加水分解速度定数(一部についてはそのpH依存性も)を求め、環化・変換・加水分解の関係を纏めた。その結果、平衡状態では、環状体が10%程度存在することが見い出された。

Research Products

• [Publications] 藤井有起 他: "ESR study of the dynamic behavior of cis, cis -1,3,5- triamino cycle hexane Cu(II) complex"Inorg.Biochem.. 98. 371-376 (2004)
• [Publications] 藤井有起 他: "Recent development of artificial nucleases with Specificity of cleavage site"Recent Reserch Developments in Nucleases & Nucleotides. (印刷中).