三角両錐型パラジウム(II)錯体のL-システイン残基認識能のペプチド分析への応用

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12640583
• Research Institution: Toyama University
• Principal Investigator: 會澤 宣一 富山大学, 工学部, 助教授 (60231099)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 蓮覚寺 聖一 富山大学, 工学部, 教授 (70019199) ; 中村 基 静岡大学, 工学部, 教授 (80022242) ; 山田 眞吉 静岡大学, 工学部, 教授 (60022737)
• Keywords: 三角両錐型パラジウム(II)錯体 / L-システイン残基 / チオレート硫黄 / 分子認識能 / グルタチオン

Research Abstract

前年度は、ホスフィン型三脚状四座配位子であるトリス(2-(ジフェニルホスフィノ)エチル)ホスフィン(PP_3)とアセトニトリルを配位子とした五配位三角両錐型パラジウム(II)錯体[Pd(PP_3)(CH_3CN)]^<2+>を用いると、アミノ酸官能基の中ではカルボキシル基やアミノ基よりもチオレート型硫黄原子を選択的に配位することが明らかになった。さらにこの錯体は立体的要因も重なり、L-メチオニン、L-ペニシルアミン、L-システインといった含硫アミノ酸の中から、L-システインのみを選択的に配位することもわかった。この結果に基づき、含硫アミノ酸混合溶液をpH9としてチオールを配位可能とし、L-システインだけをクロロホルム層にL-システナト錯体として抽出分離できた。さらに、生理活性ペプチドであるグルタチオンの定量は、pH9のグルタチオン水溶液と、[Pd(PP_3)(CH_3CN)](BF_4)_2のアセトニトリル溶液を混合し、分光光度定量することができた。配位リン原子の光酸化反応を阻害するために、遮光条件嫌気下で行うと、検出限界が改善されることがわかった。一方、酸化型のグルタチオンはチオレート硫黄原子がジスルフィド結合となっているため、チオラト錯体は形成しなかった。したがって、還元型と酸化型のグルタチオンが共存する系において、還元型グルタチオンのみを選択定量できることがわかり、生体内酸化還元系の抗酸化状態を検知するために応用できることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Yasumasa Kanekiyo: "Complexation Equilibria of Oxy-Acid-2-Amino-2-Deoxy-D-Gluconic Acid- Metal(II) Ion Ternary Systems in Aqueous Solution As Studied by Potentiometry. Binding Characteristic of Borate and Germanate"Inorganica Chimica Acta. 298・2. 154-164 (2000)
• [Publications] Motoshi Nakamura: "Fluorometric Determination of Ethofenprox in Waters by Using Solid-Phase Extraction"Fresenius'Journal of Analytical Chemistry. 367・7. 658-660 (2000)
• [Publications] Sen-ichi Aizawa: "Circular Dichroism Spectrophotometric Determination of Metal Ions Using Optically Active Tris(thiolato) Type Rhodium(III) Complexes"Bulletin of the Chemical Society of Japan. 73・9. 2043-2050 (2000)
• [Publications] Sen-ichi Aizawa: "Discrimination of Thiolate Group in L-Cysteinate and Glutathionate by Axial Coordination Site of Five-Coordinate Trigonal-Bipyramidal palladium(II) Complex with Tris(2-(diphenylphosphino)ethyl)phosphine"Chemistry Letters. ・12. 1412-1413 (2000)
• [Publications] Sen-ichi Aizawa: "Kinetic Effect of Zinc(II) and Cadmium(II) Ions on Configurational Inversion of 〓_<LLL>-fac(S)-Tris(L-cysteinato-N, S)cobalt(III) Complex"Analytical Sciences. 17・2. 339-343 (2001)
• [Publications] Motoshi Nakamura: "Relation of Sorption Behavior of Agricultural Chemicals in Solid-Phase Extraction with Their n-Octanol/Water Partition Coefficients Evaluated by High-Performance Liquid Chromatography(HPLC)"Analytica Chimica Acta. 428. 219-226 (2001)
• [Publications] Makoto Wakabayashi: "Pressure Studies on the Metallation of Porphyrin-Carring Copolymers"Macromolecular Chemistry and Physics. 202. 3136-3141 (2001)
• [Publications] Sen-ichi Aizawa: "Thiolato-Ligand Substitution Reaction with Halide Ions of Five-Coordinate Trigonal-Bipyramidal Palladium(II) Complexes with Tris(2-(diphenylphosphino)-ethyl)phosphine. Electronic and Steric Effects on the Reaction Mechanism"Bulletin of the Chemical Society of Japan. 75・1. 91-97 (2002)