2002 Fiscal Year Annual Research Report
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12660085
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| Research Institution | Hokkaido Tokai University |
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Principal Investigator |
松山 英俊 北海道東海大学, 工学部, 教授 (60209666)
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| Keywords | 多糖類 / Novosphingobium rosa / Rahnella aquatilis / Arthrobacter属細菌 / Microbacterium kitamiense / DNA-DNA交雑 / Rhodococcus tukisamuensis / 多糖類分解酵素 |
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| Research Abstract |
1.Novosphingobium rosaの生産する多糖類
N. rosaと同定した菌株は培養後、エタノールで多糖類を抽出すると、液の上層に浮かぶ多糖類(S上)と下層に沈殿している多糖類(S下)を生成するが、それぞれの構成糖は似ており、共にマンヌロン酸が含まれていた。通常のsphinganはグルクロン酸を含んでおり、新規多糖類を生産していることが判明した。この多糖類を基質として生育してくる分離菌株を数100株得た中から、多糖類分解酵素生産菌を選択しようと試みたが、活性の高い菌株は得られなかった。
2.Rahnella aquatilisの生産する多糖類を加水分解する酵素の精製
酵素生産菌であるArthrobacter属細菌を用いて、酵素の精製を行った。ミニジャーファメンターで1日培養後、培養除菌液を硫安塩析(40-80%)、疎水クロマトグラフィー、DEAEイオン交換クロマトグラフィー(NaCl,0-0.8M)、Sephacryl S200を用いたゲルクロマトグラフィーを行った。その結果、SDS電気泳動的に単一バンドが得られた。バンドをPVDF膜に転写後、N末端アミノ酸配列を決定した。多糖類レバンを加水分解する酵素の配列と高い相同性を示した。酵素反応生産物の構造決定を試みたが、脱塩処理が充分で無く、今後の検討課題である。
3.Microbactrium kitamienceの生産する多糖類を分解する細菌の同定
本菌の多糖類を炭素源として生育した土壌細菌の内、Mb8株は生理学的生化学的性質、キノン分析、脂肪酸分析,16SrRNA塩基配列からの系統解析、DNA-DNA交雑実験を行い、新種であることが判明した。Mb8株をRhodococcus tukisamuensis (JCM 11308=NCIMB13903)と命名し、IJSEMに受理された。
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Research Products
(2 results)
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[Publications] H.Matsuyama, T.Kamesaki, R.Sasaki, H.Minami, I.Yumoto: "Production of Two types of Exopolysaccharide by Novosphingobium rosa"Journal of bioscience and bioengineering. 95巻、2号. 152-156 (2003)
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[Publications] H.Matsuyama, I.Yumoto, T.Kudo, O.Shida: "Rhodococcus tukisamuensis sp. nov., isolated from soil"International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. (印刷中).
