2001 Fiscal Year Annual Research Report

ウシ及びウマにおける除核未受精卵の保存と核移植に関する研究

Research Project

Project/Area Number	12660252
Research Institution	Shinshu University
Principal Investigator	花田章信州大学, 繊維学部, 教授 (80273077)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	平林真澄 (株)ワイエスニューテクノロジー研究所, 発生工学研究室, 室長保地眞一信州大学, 繊維学部, 助教授 (10283243)
Keywords	核移植 / クローン / 凍結保存 / 除核 / LAA / エチレングリコール / ウシ / ウマ
Research Abstract	核移植によってクローン動物を作製するためにはドナー核のリプログラミングと再構築後の胚発生を支持する除核未受精卵が必要で、本研究はこの除核未受精卵の保存技術の開発を通し、ウシ及びウマにおけるクローン作製技術を効率化しようとした。得られた結果を以下に要約する。(1)ウシ除核未受精卵の耐凍性は、体外受精由来胚の耐凍性を改善する効果のあるリノール酸アルブミン(LAA)を体外成熟・除核・活性化誘起といった一連の除核未受精卵の調製過程の全培養液に添加することで増強された(Hochiら、J.Vet.Med.Sci.誌、2000)。(2)最近になってウシ卵母細胞の有効な超低温保存法として超急速冷却行程を特徴とするガラス化保存法が注目されている。加温速度に関わりなく冷却速度を毎分3,000〜5,000℃にするような保管容器を選ぶことによって、非冷却区と遜色のない体外受精成績を得た(Hochiら、Cryobiology誌、2001)。(3)受精卵の体外作出システムが確立されていないウマにおいて、ハムスター裸化卵子への精子侵入能に基づいて、0.1μMイオノフォアA23187、2分間というウマ精子に有効な受精能獲得条件を決定した(Matsukawaら、J.Reprod.Dev.誌、2002)。(4)このイオノフォア処理を顕微授精(卵細胞質内精子顕微注入法:ICSI)に供試する前のウマ精子に施し、65%の正常受精卵率を得るとともに体外培養によってICSI由来のウマ胚盤胞を得ることにも成功した(Matsukawaら、第28回国際胚移植学会でポスター発表、2002)。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Shinichi Hochi他: "Nuclear Transfer in Cattle : Effect of Linoleic Acid-Albumin on Freezing Sensitivity of Enucleated Oocytes"Journal of Veterinary Medical Science. 62・10. 1111-1113 (2000)
[Publications] 保地眞一: "ウシ未受精卵ならびに前核期卵の超低温保存(総説)"日本胚移植学雑誌. 22・1. 17-22 (2000)
[Publications] Shinichi Hochi他: "Effects of Cooling and Warming Rates During Vitrification on Fertilization of In Vitro-Matured Bovine Oocytes"Cryobiology. 42・1. 69-73 (2001)
[Publications] Megumi Kato他: "Strontium-Induced Actiration Regimen for Rat Oocytes in Somatic Cell Nuclear Transplantation"Journal of Reproduction and Development. 47・6. 407-413 (2001)
[Publications] Ayumu Takeuchi他: "Effect of Ca^<2+>/Mg^<2+>-Free Culture Condition on Spontaneous First Cleavage of Rat Oocytes"Journal of Reproduction and Development. 48・3(未定). (2002)
[Publications] Kazutsugu Matsukawa他: "Effects of Caffeine and Ionophore A23187 on In Vitro Capacitation of Stallion Spermatozoa"Journal of Reproduction and Development. 48・4(未定). (2002)
[Publications] 保地眞一: "生殖工学のための講座卵子研究法"養賢堂:鈴木秋悦・佐藤英明編. 7 (2001)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

ウシ及びウマにおける除核未受精卵の保存と核移植に関する研究

Principal Investigator

花田 章 信州大学, 繊維学部, 教授 (80273077)

Research Products

[Publications] Shinichi Hochi他: "Nuclear Transfer in Cattle : Effect of Linoleic Acid-Albumin on Freezing Sensitivity of Enucleated Oocytes"Journal of Veterinary Medical Science. 62・10. 1111-1113 (2000)

[Publications] 保地 眞一: "ウシ未受精卵ならびに前核期卵の超低温保存(総説)"日本胚移植学雑誌. 22・1. 17-22 (2000)

[Publications] Shinichi Hochi他: "Effects of Cooling and Warming Rates During Vitrification on Fertilization of In Vitro-Matured Bovine Oocytes"Cryobiology. 42・1. 69-73 (2001)

[Publications] Megumi Kato他: "Strontium-Induced Actiration Regimen for Rat Oocytes in Somatic Cell Nuclear Transplantation"Journal of Reproduction and Development. 47・6. 407-413 (2001)

[Publications] Ayumu Takeuchi他: "Effect of Ca^<2+>/Mg^<2+>-Free Culture Condition on Spontaneous First Cleavage of Rat Oocytes"Journal of Reproduction and Development. 48・3(未定). (2002)

[Publications] Kazutsugu Matsukawa他: "Effects of Caffeine and Ionophore A23187 on In Vitro Capacitation of Stallion Spermatozoa"Journal of Reproduction and Development. 48・4(未定). (2002)

[Publications] 保地 眞一: "生殖工学のための講座 卵子研究法"養賢堂:鈴木秋悦・佐藤英明 編. 7 (2001)

花田章信州大学, 繊維学部, 教授 (80273077)

[Publications] 保地眞一: "ウシ未受精卵ならびに前核期卵の超低温保存(総説)"日本胚移植学雑誌. 22・1. 17-22 (2000)

[Publications] 保地眞一: "生殖工学のための講座卵子研究法"養賢堂:鈴木秋悦・佐藤英明編. 7 (2001)