生殖系幹細胞の癌化に関与する遺伝子群の単離・同定

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12670227
• Research Institution: Tokyo Metropolitan Organization For Medical Research The Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
• Principal Investigator: 田中 貴代子 財団法人 東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (40124474)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 原 孝彦 財団法人 東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (80280949)
• Keywords: RDA / 精原細胞 / cDNAマイクロアレイ / JSD / W / Wv / 遺伝子発現 / リポカリン / 癌抑制遺伝子

Research Abstract

生殖系列の癌化機構の解明を目標にして、生殖幹細胞である精原細胞に特異的に発現する遺伝子の単離するために、精原細胞で分化が停止しているJSDマウス特異的に発現する遺伝子群の解析をおこなった。JSDとW/Wv変異マウス精巣から調製したmRNAを用いてcDNAマイクロアレイ解析とRDA法によりJSD精巣でのみ強く発現しているprostaglandin D2 synthetaseや24p3などのリポカリン群、肺癌細胞株で遺伝子変異が報告されているProtein tyrosin phosphatase-TD14やB型肝炎ウイルスX抗原癌遺伝子により発現抑制されるSuiなどの癌抑制遺伝子などを含め、既知遺伝子20個と機能未知遺伝子4個を単離した。さらに、これらの遺伝子の発現について詳細に調べたところ1)JSDマウス特異的遺伝子群はすべて、精原細胞で分化が停止しているCryptorchid精巣でも発現していた。2)それらは正常マウスでは胎生13.5日のゴナドから成獣の精巣まで発現していた。3)12週令精巣切片を用いたIn situ hybridizationでは解析したすべての遺伝子が精細管の基底部にある細胞群で発現が観られた。4)SSEA-1とEE2抗休を用いてFACSにより分離した生殖系列細胞分画と体細胞分画での各遺伝子発現をRT-PCRにより調べたところ、24遺伝子中16遺伝子が生殖系列細胞分画に比べ体細胞分画で発現量が増加していた。
以上の結果から、JSDマウス精巣特異的遺伝子の多くは精原細胞の存在に依存して発現が制御される遺伝子であることが示唆された。精原細胞はこれらの遺伝子群の発現調節を支配することで精巣の機能維持などに関与していると推察される。

Research Products

• [Publications] 原孝彦, 田中貴代子: "幹細胞を用いた遺伝子発現解析"ゲノム医学. 2. 77-84 (2002)
• [Publications] Kiyoko Tanaka, et al.: "Spermatogonia-Depcndent Expression of Testicular Genes in Mice"Developmental Biology. (2002)