Immunophilinによるドパミンニューロン終末再生に関する研究―パーキンソン病剖検脳を用いた検討―

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12670615
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 近藤 智善 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (50103891)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 広西 昌也 和歌山県立医科大学, 医学部, 助手 (80316116) ; 河本 純子 和歌山県立医科大学, 医学部, 助手 (90254557) ; 紀平 為子 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (30225015)
• Keywords: neurommunophilin / GPI-1046 / MPTP / Parkinson's disease / cyclophilin / immunohistochemistry / dopamine neuron / neuroprotection

Research Abstract

パーキンソン病患者および非神経疾患の剖検脳のホルマリン固定標本および凍結保存脳を対象に,抗ヒトcyclophiln A抗体を用いた免疫組織化学,免疫ブロッテイング法による検討を行った.両法により対照,パーキンソン病とも黒質にcyclophilin Aの発現がみられ,その発現は黒質ニューロンの細胞質に分布することを明らかにした.この結果,immunophilinリガンドを投与した場合,ヒトにおいても黒質細胞に結合部位があり,immunophilinリガンドの治療的応用の可能性が確認された.
C57BL6マウスのMPTP(1-methyl-4-hydroxyl-2,3,4,6-tetrahydropyridine)投与パーキンソニズムモデルを対象に,MPTP(30mg/kgを一日2回,2日間)投与1週間前より,immunophilinリガンドの一種GPI-104610mg/kgを連日皮下投与,MPTP投与終了後7日間経過ののち,マウス線条体のドパミンを測定しMPTP毒性に対するGPI-1046のドパミンニューロン保護効果を検討した.また同じ実験系のMPTP投与後第5日目にマウス脳の灌流固定を行い,中脳の連続30μm間隔6μm厚の10切片について,抗チロシン水酸化酵素(TH)抗体を用いた免疫染色を行いドパミン産生細胞の細胞数定量を行った.その結果,TH陽性細胞数(平均±SD)は対照66.6±30.6,MPTP投与40.7±14.6,MPTP+GPI-1046投与63.5±25.2で,GPI-1046によるMPTP毒素からの細胞保護が示唆される結果を得た.サルMPTPモデルにおけるGPI-1046投与の効果については現在研究を継続進行中である.

Research Products

• [Publications] Kondo T, et al.: "Expression of immuunophilin (cyclophilin) in the nigrostriatum of parkinsonian brain"Movement disorders. 15. P275 (2000)
• [Publications] Mogi M, Togari A, Kondo T, et al.: "Caspase activities and tumor necrosis factor receptor R1 (p55) level are elevated in the substantia nigra from parkinsonian brain"J Neural Transm. 107. 335-341 (2000)
• [Publications] Kobayashi T, Mang M, Hattori N, Matsumine H, Kondo T, et al.: "Exonic deletion of the Parkin gene among sporadic patients with Parkinson's disease"Parkinsonism and Related Disorders. 6. 129-131 (2000)
• [Publications] Kondo T: "Treatment of Parkinson's disease in Japan"Parkinsonism and related disorders. 7. 71-77 (2000)
• [Publications] Kondo T, et al.: "Nonimmunosuppressive immunophilin ligand, GPI 1046,protects nigral neurons of C57BL mouse from MPTP toxicity"Parkinsonism & related disorders. 7. S20 (2001)
• [Publications] Mogi M, Togari A, Kondo T, et al.: "Glial cell line-derived neurotrophic factor in the substantia nigra from control and parkinsonian brains"Neurosci Lett. 300. 179-181 (2000)