2000 Fiscal Year Annual Research Report
終末糖化物質抑制剤としてのアセトアルデヒドの脳内作用の研究
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12670951
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
林 和秀 札幌医科大学, 医学部, 助手 (40315510)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
齋藤 諭 札幌医科大学, 医学部, 助手 (30295357)
中野 倫仁 札幌医科大学, 医学部, 講師 (20284995)
斎藤 利和 札幌医科大学, 医学部, 教授 (50128518)
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| Keywords | acetaldehyde-amadori product / advanced glycation end-products / acetaldehyde / ethanol / AGE inhibitor / French paradox / Alzheimer's disease |
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| Research Abstract |
1.AAP(acetaldehyde-amadori product)の作成のための予備的検討
Rabbit albuminまたはBSAをD-glucoseと種々の条件下で6〜8週間反応させた。この反応からアマドリ・プロダクトを生成するための条件として、(1)D-glucose濃度は0.5M(0.01M,0.1Mとの比較)以上は必要であること。(2)bufferはPBSでは反応が進まず、0.2M sodium phosphate bufferが適切であること。(3)フィルターにより除菌を行えば、長期にわたるincubationを行ってもコンタミネーションは起こさないこと。以上の三点が明らかにされた。
2.AAPの作成
以上の予備的検討をふまえて、下記の反応条件を設定した。
1)Rabbit albumin(RA)500mg,D-glucose 1.8g,0.2M sodium phosphate buffer total 10ml
2)BSA500mg,D-glucose 1.8g,0.2M sodium phosphate buffer total 10ml
上記1),2)をクリーンベンチ内でフィルターをかけ、無菌処理をした後、37℃で48時間インキュベートした。その後、透析を48時間行い、再度フィルターを使用して除菌した後、アセトアルデヒド400μlを加える。さらに37℃で10日間インキュベートし、RA-AAP,BSA-AAP候補物質を作成した。
候補物質をコーティングし、抗AGE抗体を一次抗体としてELISAを行ったところ、AGEの反応はほとんど認められなかった。すなわち、AGEの前駆物質であるアマドリ・プロダクトが含まれている可能性が高いと考えられた。
今後、この物質をウサギに免疫し、RA-AAP,BSA-AAPに対する抗体を作成する。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] Nobuyuki Sasaki,Yorihide Hayashi, et al: "Immunohistochemical distribution of the receptor for advanced glycation end products in neurons and astrocytes in Alzheimer's disease"Brain Research. 888. 256-262 (2001)
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[Publications] Nobuyuki Sasaki,Yorihide Hayashi, et al: "Immunohistochemical distribution of a zinc finger protein KF-1 in Alzheimer's brains"Society for Neuroscience Abstracts. 26. 1549-49 (2000)
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[Publications] Norihito Nakano,Yorihide Hayashi,Nobuyuki Sasaki, et al: "Visual cognitive Impairment in depressed patients"Society for Neuroscience Abstracts. 26. 2312-12 (2000)
