造血因子受容体遺伝子導入による骨髄異形成症候群の遺伝子治療の研究

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12670980
• Research Institution: Hamamatsu University School of Medicine
• Principal Investigator: 大西 一功 浜松医科大学, 医学部・附属病院, 講師 (80252170)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉田 均 浜松医科大学, 医学部, 助手 (30303548) ; 竹下 明裕 浜松医科大学, 医学部・附属病院, 助手 (00242769)
• Keywords: 骨髄異形成症候群 / 遺伝子治療 / 顆粒球コロニー刺激因子受容体遺伝子 / エリスロポエチン受容体遺伝子 / トロンポボエチン受容体遺伝子 / レトロウイルスベクター / 分化誘導 / 遺伝子導入

Research Abstract

【目的】
造血幹細胞のクローン性異常に基づく造血障害と考えられている骨髄異形成症候群(MDS)に対しサイトカインレセブター遺伝子(G-CSF receptor,Erythropoietin receptor,c-mpl)をMDS細胞(細胞株と臨床検体)にレトロウイルスベクター(pMX)を用いて遺伝子導入を行い、MDS患者の減少した血球成分のサイトカイン刺激による回復の可能性を検討した。
【結果】
(1)MDS細胞に導入したG-CSFR,EpoR,c-mplの遺伝子発現はRT-PCR法、フローサイトメトリー法により非感染細胞と比較して発現量の増加が認められた。
(2)G-CSFレセプター遺伝子を高効率に導入したMDS細胞株(MDS-L)は、G-CSF添加刺激により好中球へ分化することが示された。臨床検体では分化誘導効果は認められなかった。
(3)Epoレセプター遺伝子を導入したMDS-L細胞株および臨床検体ではEpo刺激によって赤芽球系細胞への分化は認められなかった。
(4)c-mpl遺伝子を導入したMDS-L細胞株はThrombopoietin(TPO)刺激によって巨核球系細胞への分化は認められなかったが、TPO刺激により細胞増殖効果が認められた。臨床検体では分化誘導効果は認められなかった。
【考察】
G-CSFレセプターcDNAを遺伝子導入したMDS-L細胞株はG-CSFの刺激により分葉好中球へ分化したが、Epoレセプターとc-mpl cDNAを遺伝子導入したMDS-L細胞株では分化誘導効果は認められず、c-mpl cDNAを遺伝子導入したMDS-L細胞株では増殖効果が認められた。これらの結果はMDS-Lがすでに骨髄系細胞への分化を方向付けられていることによると考えられた。臨床検体においては遺伝子導入効率が低く、臨床に応用するには導入効率の改善が必要であると考えられた。

Research Products

• [Publications] Satoki Nakamura: "Retrovirus-mediated gene transfer of granulocyte-colony stimulating factor receptor (G-CSFR) cDNA into MDS cells and induction of their differentiation by G-CSF."Cytokines,Cellular,and Molecular Therapy. 6. 61-70 (2000)