成人T細胞白血病(ATL)細胞のアポトーシス制御因子の探索

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12670993
• Research Institution: Nagasaki University
• Principal Investigator: 前田 隆浩 長崎大学, 医学部・付属病院, 助教授 (40284674)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 上平 憲 長崎大学, 医学部, 教授 (80108290) ; 森内 良三 長崎大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (60210142)
• Keywords: Fas / 成人T細胞白血病 / ATL / アポトーシス / 遺伝子変異 / 三量体

Research Abstract

1. 抗Fas抗体抵抗性の成人T細胞白血病(ATL)細胞株RS04
IgM抗Fas抗体抵抗性のATL細胞株であるRSO4の樹立に成功した。この細胞株にIgM抗Fas抗体を添加培養してもapoptosisは起こさず、細部増殖にもほとんど影響を与えない。さらにproteosomeの特異的阻害剤であるlactacystinによってRSO4のcaspase 8が活性化され、正常のapoptosisを誘導できることから、RSO4細胞質のapoptosisのpathwayには異常がないことが確認された。このRSO4から抽出したRNAを用い、Fas抗原遺伝子cDNA全長のsequenceを行った結果、開始コドンから179番目の塩基アデニンがチミンへ変化する点突然変異を検出した。この点突然変異はFasタンパクの細胞外部分である60番目のヒスチジンがアルギニンに変異していることを意味し、この点突然変異を有したFasタンパクの三次元解析では、正常のFasタンパクに比し細胞外部分の52〜58アミノ酸付近の構造に大きな変化が生じることが判明した。この構造変化によってFasタンパクの正常な三量体形成が阻害され、apoptosisのシグナル伝達がdominant negativeに抑制されたものと考えられる。
2.膜型Fasタンパク低発現ATL細胞
抗Fas抗体抵抗性のATL細胞株にはFas遺伝子の変異が高率に認められることから、膜Fasタンパク陰性のATL症例7例を蓄積し、この症例のATL細胞について検討した結果、ATL細胞は明らかに抗Fas抗体に抵抗性であり、7例中4例で遺伝子変異(pointmutation、2bpのdeletion)を検出した。ATL細胞のapoptosis制御因子の一つとして、Fas遺伝子の様々な変異が様々な機序で関与していることが考えられる。

Research Products

• [Publications] Maeda T.: "Apoptosis part II : role of mutated Fas genes in tumorigenesis."Adv.Chin.Chem.. 36. 109-137 (2001)
• [Publications] Hayashibara T.: "Vascular endothelial growth factor and cellular chemotaxis : a possible autocrine pathway in adult T-cell leukemia cell invasion."Clin.Cancer Res.. 7. 2719-2726 (2001)
• [Publications] Okazaki S.: "HTLV-1 proviruses encoding non-functional TAX in adult T-cell leukemia."Virus Genes. 23. 123-135 (2001)
• [Publications] Isomoto H.: "Clinical and endoscopic features of adult T-cell leukemia/lymphoma with duodenal involvement."J.Clin.Gastroenterol.. 33. 241-246 (2001)
• [Publications] Isomoto H.: "Jejunal perforation in a patient with adult T-cell leukemia."Leukemia and Lymphoma. 42. 1423-1427 (2001)