2001 Fiscal Year Annual Research Report
膵β細胞およびα細胞の特性を規定する遺伝子獲得のための分子基盤研究
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12671115
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
吉本 勝彦 徳島大学, 医学部, 客員教授 (90201863)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
板倉 光夫 徳島大学, ゲノム機能研究センター, 教授 (60134227)
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| Keywords | 膵島 / large scale cDNA squereing / DNAマイクロアレイ / セリンプロテアーゼ |
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| Research Abstract |
1.膵島β細胞に特異的に発現する遺伝子の解析
膵島β細胞由来の細胞株MIN6細胞より作製したcDNAライブラリーの塩基配列を決定することにより、膵島β細胞に特異的に発現していると考えられる遺伝子を単離した。構造的にはセリンプロテアーゼと構造が類似しているが、HDSモチーフを2箇所に有する点で他のセリンプロテアーゼとは異なる。細胞内では、ゴルジ体、小胞体膜に密接した状態で存在すると考えられる。現在、1)本遺伝子産物が実際にプロテアーゼ活性を有するのか、2)抗体を作成して蛋白発現を確認する、3)ヒト膵島cDNAライブラリーよりヒト・ホモログの単離を進めている。
2.DNAマイクロアレイを用いた遺伝子発現解析
計8734個のマウスcDNAをスポットしたアレイに対して、MIN6および膵島α細胞株α-TC1.6から抽出したRNAを用いて、両細胞間における遺伝子発現量を比較した。両細胞間で数倍の発現の差が得られたクローンについては、ノーザン解析にて発現量の差異を確認した。その結果、DNAマイクロアレイの結果とノーザン解析の結果がほぼ一致していることを明らかにした。さらに腸内分泌細胞株でproglucagon遺伝子を発現しているGLUTag細胞とMIN6細胞あるいはα-TC1.6細胞間の遺伝子発現の差異をDNAマイクロアレイで検討した。その結果、α-TC1.6の発現パターンは膵島細胞株であるMIN6細胞よりも同じproglucagon遺伝子を発現しているGLUTag細胞の発現パターンにより類似していることを明らかにした。
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