サイトカインによるNF-kB活性化制御とアポトーシスの誘導

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671228
• Research Institution: Okayama University Hospital
• Principal Investigator: 羽井佐 実 岡山大学, 医学部・附属病院, 助手 (70322229)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田中 紀章 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (10127566) ; 猶本 良夫 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (00237190)
• Keywords: サイトカインクロストーク / アポトーシス / NF-kB / TNF / IFN-α

Research Abstract

アポトーシスはTNF-αの抗腫瘍効果の主要メカニズムと考えられているが、TNF-αによるNFkBの活性化はアポトーシスに対し抑制的と言われている。我々はTNF-αの抗腫瘍効果は、IFN-αにより増強され、それはアポトーシスの増強によりもたらされていることをヒト大腸癌細胞株RPMI4788を用いて示してきた。そこで、TNF-αとIFN-αの併用によりNFkBの活性化が抑制されアポトーシスの増強が見られているのではないかとの仮説をたて、アポトーシスの増強とNFkBの活性化の関係について検討した。
抗NFkB抗体を用いた免疫組織染色およぴ、EMSAによる研究の結果、仮説に反しNFkBの活性化は増強しており、生体内で複雑に影響しあい効果を発現する生理活性物質の相互作用、つまりサイトカインクロストークによる(TNF-αとIFN-αの併用による)アポトーシスの増強が、それぞれ単独の刺激よりも早期に、強いNFkBの核内移行を伴っている事が確認された。また、NFkBのDNA結合部位への結合を阻害するおとり型核酸医薬NFkBデコイを用いて、この実験系におけるNFkBの活性化をNFkBの核内移行に影響を与えずに抑え、ひいてはTNF-αとIFN-αの併用によりもたらされるアポトーシスの増強をも抑制し、殺細胞効果を減弱しうることを証明した。
また、このTNF-αとIFN-αの併用によるアポトーシスの増強にFasが関与しており、NFkBデコイを用いてFasの発現が抑制されること、抗FasL抗体によりTNF-αとIFN-αの併用によるアポトーシスが抑制され殺細胞効果も減弱することが示された。結果は現在投稿中である。