神経線維腫症2型にともなう神経鞘腫に対する遺伝子治療法の開発

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671351
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 齋藤 清 名古屋大学, 医学部・附属病院, 講師 (00240804)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 水野 正明 名古屋大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (70283439) ; 永谷 哲也 名古屋大学, 医学部・附属病院, 助手 (80324408)
• Keywords: 神経線維腫症2型 / 神経鞘腫 / 遺伝子導入 / VEGF / 神経内視鏡 / PPARγ

Research Abstract

神経線維腫症2型(NF2)に伴う神経鞘腫は多発のために治療困難であり、新しい治療法開発が求められている。腫瘍増殖抑制を目的とした遺伝子治療開発のため、昨年度はアデノウイルスベクターを用いた神経鞘腫培養細胞への遺伝子導入、神経鞘腫でのVEGF(vascular endothelial growth factor)の発現を報告した。今年度には以下の研究を行った。
1.VEGF抑制による遺伝子治療の開発
手術時に採取した神経鞘腫の初代培養を行い、培養液中のVEGF濃度を測定した。対照とした下垂体腺腫細胞ではVEGFは100pg/m以下と低値であったが、神経鞘腫細胞では100〜1180pg/mlとVEGF産生を認め、特に第6〜9日で高値を呈した。この結果は、VEGFが増殖に関与していることを示唆している。そこで、VEGFを可溶性VEGFレセプターでブロックして神経鞘腫細胞増殖を抑制する遺伝子治療を計画し、Flt-1細胞外ドメイン過剰発現アデノウイルスベクターを準備した。今年度にはNF2の手術がなく、NF2に伴う神経鞘腫培養細胞での実験は未施行である。
2.神経膠腫に対するPPARγリガンドによる抗腫瘍効果
核内受容体peroxisome proliferator-activated receptorγ(PPARγ)の発現を神経膠腫で確認し、リガンドの投与による増殖抑制を証明した。脳腫瘍の新たな増殖抑制機序の開発に繋がると考える。
3.内視鏡による遺伝子導入
遺伝子治療には安全な遺伝子導入法開発が不可欠である。NF2では神経鞘腫が脳および脊髄神経に多発するため、神経内視鏡による腫瘍内への直接注入が確実な方法と考えられる。この基礎実験を犬を用いて行った。後頭下開頭または腰椎椎弓切除の後、神経内視鏡を用いて脊髄クモ膜下腔を観察した。細径内視鏡によりほぼ脊髄全長の脊髄神経観察が可能であった。現有の細径内視鏡では薬剤注入が困難であり、薬剤注入用チャネルを有した細径内視鏡の開発が課題となった。

Research Products

• [Publications] Mihoko Kato: "Growth inhibition of PPARγ expressing brain tumor cells by its own ligand"Environmental Medicine. 45. 26-28 (2001)
• [Publications] Kiyoshi Saito: "Expression of Ki-67 antigen and vascular endothelial growth factor in sporadic and neurofibromatosis type 2-associated schwannomas"Neurologia medico-chirurgica. (in press).