2001 Fiscal Year Annual Research Report
子宮体癌老化誘導活性をもったYACクローンからの子宮体癌抑制遺伝子のクローニング
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12671614
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| Research Institution | KYUSHU UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
加藤 秀則 九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (60214392)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
和氣 徳夫 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (50158606)
松田 貴雄 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (10304825)
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| Keywords | endometrial cancer / suppressor gene / cell senescence / BAC / chromosome 1 / ORF12 |
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| Research Abstract |
前年度までの研究で、(1)D1S459-225内に存在するBACクローンをHHUA株に導入し老化活性を観察したところ、その中の一つのクローンE4に細胞死誘導活性が見られ、このクローンはD1S437-459のマーカーを含む約1Mbの領域であることを明らかにし、(2)このBACクローンから、このBACクローンにコードされるcDNA群を得た。
こうして得られたcDNA群の候補遺伝子は、(1)RB binding protein like protein (2)FLJ12790 (E6BPl homologue) (3)ENST27746 (MAP homologue) (4)ORF12 (SM-20 like protein) (5)HUBCEP80 (Ubiquitin E1 like)などであった。このうちRNA解析で、(4)については既存のデータベースmRNAの長さが異なっていたため、5'-RACEを行い配列を決定した。
これら遺伝子のうち真の候補を決定するスクリーニングを本年度行った。
(a)得られたcDNA群を発現誘導ベクターに挿入し、それぞれをHHUAに導入する。細胞死誘導活性を持つものを選択する。(b)癌の検体(現在約40例の子宮体癌症例RNAストックが使用可能である)のSSCP解析で、発現の変化または遺伝子変異の有無をスクリーニングする、の(a)(b)両方の条件を満たすものを子宮体癌抑制遺伝子候補とすることとした。(b)の検定を先に行ったところ(1)、(3)では有意な体細胞変移や発現変化は見いだせなかった。(5)は体細胞変移が観察されたが、HHUAへの移入では老化誘導活性は示さなかった。現在(a)(b)両方の条件を満たすものとしては(4)のORF12 (SM-20 like protein)が得られている。
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[Publications] N.Shahib et al.: "Genetic Origin of Malignant Trophoblastic Neoplasms Analysed by Sequence Tag Site Polymorphic Markers"Gynecologic Oncology. 81. 247-253 (2001)
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[Publications] Terao Y et al.: "Sodium butyrate induces growth arrest and senescence-like phenotypes in gynecological cancer cells"International Journal of cancer. 94. 257-267 (2001)
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[Publications] 加藤秀則 他: "悪性腫瘍の遺伝子診断、遺伝子治療6 癌遺伝子治療の将来"臨床婦人科産科. 55,8. 934-936 (2001)
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[Publications] 加藤秀則 他: "新女性医学大系41(遺伝子を標的とした治療:婦人科腫瘍の分子・細胞生物学)"中山書店. 325-335 (2001)
