2000 Fiscal Year Annual Research Report
ヘリックス・ループ・ヘリックス型転写因子DEC1の軟骨分化過程における役割
Project/Area Number |
12671809
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Research Institution | Hiroshima University |
Principal Investigator |
河本 健 広島大学, 歯学部, 助手 (50224861)
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Keywords | DEC1 / 軟骨 / PTH / 遺伝子発現 / 細胞分化 / cAMP |
Research Abstract |
ヒトのDEC1遺伝子をクローニングして、その全一次構造を決定した.全長約5kbのDEC1遺伝子は,5つのエクソン4つのイントロンから構成されていた.また,上流約3kbまでのプロモータ領域の配列も決定したところ,2つのcAMP応答エレメントと5つのE boxなどがあり,また,転写開始点付近にはTATAボックスはなく,複数のGCボックスが存在した. そのDEC1遺伝子プロモータから,長さの異なる6種類の断片を作製し,プロモータ活性測定用ベクターにクローニングし,培養細胞へ導入したところ,すべてのクローンに高いプロモータ活性が認められた.現在,cAMPなどの様々な誘導物質を添加して,それに対する応答性を検討中である. 様々な細胞でのDEC1の発現誘導についてmRNAレベルで調べたところ,多くの細胞株でcAMPあるいはPTHで,その発現が短時間で誘導されることが明らかになった.さらに,誘導されたDEC1 mRNAの発現量はすみやかに低下し,その後再び上昇する傾向が認められた.また,様々な組織でのDEC1の発現量を時間を追って調べたところ,夜に高く,昼には低い周期性を持っていることも明らかになった. さらに,軟骨細胞への分化能をもつATDC細胞株にDEC1 cDNAを安定導入したところ,DEC1の過剰発現株では,軟骨細胞への分化能も高いことが明らかになった.
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Kawamoto T., et al.: "Estrogen activation of the nuclear orphan receptor CAR (constitutive active receptor or constitutive androstane receptor) in induction of the mouse Cyp2b10 gene."Molecular Endocrinology. 14. 1897-1905 (2000)
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[Publications] Kawashima T., et al.: "Archaeal adaptation to higher temperatures revealed by genomic sequence of Thermoplasma volcanium."Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 97. 14257-14262 (2000)
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[Publications] Teramoto M., et al.: "Gene structure and chromosomal location of a human bHLH transcriptional factor DEC1-stra13-SHARP-2/BHLHB2."Journal of Biochemistry. 129. 391-396 (2001)
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[Publications] Shen M., et al.: "Induction of basic helix-loop-helix protein DEC1 (BHLHB2)/Stra13/Sharp2 in response to the cyclic adenosine monophosphate pathway."European Journal of Cell Biology. (in press).
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[Publications] Nakamasu K., et al.: "Structure and promoter analysis of the mouse membrane-bound transferrin-like protein (MTf) gene."European Jouranal of Biochemistry. (in press).
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[Publications] Yoshida E., et al.: "Direct inhibition of indian hedgehog expression by parathyroid hormone (PTH)/PTH-related peptide and up-regulation by retinoic acid in growth plate chondrocytecultures"Experimental Cell Research. (in press).