おとり遺伝子を用いた顎関節症の新規遺伝子治療法の開発と応用

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671891
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 石橋 邦子 九州大学, 歯学研究院, 助手 (50243952)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 石橋 浩晃 九州大学, 歯学研究院, 助手 (90254630)
• Keywords: おとり遺伝子 / 顎関節症 / 遺伝子治療

Research Abstract

1)ヒト顎関節頭軟骨組織由来細胞の分離・培養
顎関節強直症や習慣性顎関節脱臼患者より摘出した関節頭より関節軟骨を切離し,酵素分離法により関節軟骨組織由来細胞の分離・培養法を確立した.
2)細胞培養実験により各種サイトカイン刺激が与えるuPA,MMPsの発現状況の解析
関節軟骨由来細胞におけるTNFα刺激がuPA,MMPs産生に与える影響を検討した.
TNFαにより軟骨出来細胞のuPA,MMP-1の発現が亢進することを解明した.
3)サイトカイン刺激による基質破壊産生亢進に関与する転写因子の解明
関節軟骨細胞をTNFαで刺激すると,転写因子NF-kB,Sp1の活性化がみられることを,バンドシフトアッセイにより確認した.
4)おとり遺伝子導入条件の確立
NF-kB,Sp1を標的とした合成オリゴヌクレオチド(おとり遺伝子)を,HVJ-リポソーム法を用いて,関節軟骨細胞に100%導入できる条件を確立した.